Бакуловирусная экспрессия, или Как мы перерабатываем насекомых
Бакуловирусная экспрессия, или Как мы перерабатываем насекомыхОглавление
Содержание
- Глава 2. А ты точно работаешь?
25 ноября 2022
Научно-популярный конкурс «Био/мол/текст»-2022/2023
Обзор
Тутовый шелкопряд — не только производитель шелка, но и часто используемый объект в бакуловирусной экспрессии.
flickr
Автор
- Настя Джапарова
Редакторы
- Надежда Потапова
- Андрей Панов
Темы
- «Био/мол/текст»-2022/2023
- Биология
- Биотехнологии
- Вирусология
- Генная инженерия
Статья на конкурс «Био/Мол/Текст»: Каждый из нас уже знает о том, что можно создать «минифермы» организмов, которые работают за человека. Например, дрожжи «делают» хлеб, а бактерии — антибиотики. Но потребности человечества становятся все больше, и необходимо синтезировать новые специфические вещества. Именно поэтому в данной статье будет рассказано про бакуловирусную экспрессию, благодаря которой можно синтезировать сложные белковые молекулы, а также показаны ее особенности и применение.
Эта работа опубликована в номинации «Свободная тема» конкурса «Био/Мол/Текст»-2022/2023.
Партнер номинации — компания SkyGen: передовой дистрибьютор продукции для life science на российском рынке.
«Книжный» спонсор конкурса — «Альпина нон-фикшн»
Глава 1. Знакомство с бакуловирусной экспрессией
Белки — важные органические вещества. В организме человека они выполняют строительные, регуляторные, защитные, гормональные функции. Но иногда каких-то веществ не хватает, и развиваются болезни. Для того чтобы предотвратить страшные последствия, люди придумали выделять белки из других организмов. Уже известно, что из растений и грибов можно выделять пищевые белки [1], из бактерий — необходимые для нормальной жизнедеятельности человека гормоны и антибиотики. Альтернативным источником может стать бакуловирусная экспрессия.
Бакуловирусная система экспрессии (БЭС) — это биотехнологический метод, основанный на заражении клеток насекомых специальными бакуловирусами со встроенным геном нужного нам белка. Эти вирусы являются патогенами только для членистоногих и безопасны для других живых организмов. После заражения инфицированные клетки начинают синтезировать чужеродный, то есть рекомбинантный, белок. Бакуловирусная экспрессия — это перспективное направление, потому что можно получать большое количество сложных белковых соединений при минимальных затратах.
Кто такие эти ваши бакуловирусы?
Как уже было сказано ранее, бакуловирусы — это патогены членистоногих. Они очень специфичны и заражают только один или несколько видов насекомых. Также бакуловирусы не могут реплицироваться, то есть размножаться, в клетках млекопитающих. Все эти факторы облегчают работу лабораторий и производств, которые содержат много различных насекомых [6].
Бакуловирусы делятся на четыре рода: альфа, бета, гамма и дельта. Их различают по нуклеотидным последовательностям и распространению в поражаемых насекомых [7].
Наиболее известными и используемыми в лабораториях являются альфа-бакуловирусы, поэтому мы рассмотрим именно их строение. Однако стоит заметить, что строение вируса может меняться в зависимости от стадии жизненного цикла (рис. 4).
Рисунок 4. Строение вируса ядерного полиэдроза
«Википедия»
- Отдельные вирионы (budded virions) — это стержневая вирусная частица, содержащая двухцепочечную кольцевую ДНК в специальной оболочке — капсиде. Такие вирионы необходимы для начала цикла воспроизведения вирусной ДНК и распространения инфекции в другие клетки.
- Вирионы с мембраной (occlusion derived virions) — это результат взаимодействия определенных вирионов. В процессе образуются окруженные мембраной нуклеокапсиды — тельца со множеством вирионов и белковыми включениями.
- Полиэдр (occlusion body) — представляет собой множественные вирионы с нуклеокапсидами, окруженные мембранной оболочкой из белка полиэдрина в форме многогранника. Такая форма успешно сохраняет тело вируса во внешней среде.
Взаимодействие бакуловирусов с насекомыми может быть двух видов (рис. 5). Первое — когда частицы попадают в клетку и провоцируют острый инфекционный процесс. Вскоре насекомое погибает, а бакуловирусы выходят наружу. Второе — когда вирус может существовать в теле хозяина долгое время в неактивной форме. Но под влиянием внешних условий он активизируется и приводит к разрушениям клеток.
Рисунок 5. Жизненный цикл бакуловируса
Активное взаимодействие вируса с хозяином происходит следующим образом [8]:
- Заражение личинок насекомого путем проглатывания полиэдра с вирусами внутри.
- Растворение полиэдра в щелочной среде кишки и высвобождение вирионов с мембраной.
- Транспорт гемолимфой вирионов по телу хозяина, проникновение их в клетки различных органов.
- Прикрепление вируса к ядру клетки, избавление от капсида и проникновение внутрь.
- Синтез вирусной ДНК, формирование нуклеокапсида в ядре.
- Образование полиэдров из новых вирусных частиц, которые разрушают ядро. Они выходят в строму клетки и далее — в полость тела хозяина.
- Транспорт гемолимфой отдельных вирионов, не попавших в полиэдры после выхода из ядра, что приводит к инфицированию новых клеток. Это вторичная инфекция.
Процесс повторяется, пока большинство клеток не разрушится [9].
Глава 2. А ты точно работаешь?
Суть метода: мы создаем нужную последовательность ДНК, вставляем ее в сам бакуловирус, выращиваем клетки насекомого, заражаем их созданным нами вирусом, очищаем клетки от ненужных белков.
Но это кратко. А давайте немного поговорим о деталях.
- Сначала создают специальный транспортный вектор, который состоит из плазмиды со специальными единицами экспрессии (небольшими участками ДНК с определенной последовательностью нуклеотидов), ограниченными с двух сторон последовательностями вирусного генома (рис. 6). Все это происходит в пробирках. Последовательно добавляют части транспортного вектора, при высокой температуре они присоединяются друг к другу. Далее эта конструкция нарабатывается с помощью ПЦР.
- Самым важным этапом в БЭС является создание рекомбинантного бакуловируса, то есть имеющего в своей ДНК ген необходимого для нас белка. Так как в транспортном векторе есть участки с фрагментами вирусного генома, то за счет них происходит встраивание единицы экспрессии (рис. 7).
Рисунок 7. Рекомбинация между вирусной ДНК и транспортной плазмидой
Основные вирусы, используемые в работе: Autographa californica multipolyhedrovirus (AcMNPV), Cydia pomonella granulovirus (CpGV), Lymantria dispar multicapsid nuclear polyhedrosis virus (LdMNPV) [11].
Существует несколько методик создания рекомбинантного бакуловируса (рис. 8):- Во-первых, можно использовать трансфекцию насекомых — введение ДНК через мембрану клетки. Для этого культуру клеток насекомых инфицируют бакуловирусом, далее добавляют транспортный вектор с закодированным нужным нам белком. Он встраивается в вирусную ДНК. После вся эта смесь очищается от вируса без встроенной последовательности, что делает эту методику создания рекомбинантного вируса самой трудоемкой из всех трёх.
- Во-вторых, можно использовать клетки бактерий, таких как Escherichia coli. Этот метод наиболее популярен в лабораториях. Как и в первом случае, происходит процесс поглощения свободной ДНК из среды и ее встраивание. Однако рекомбинантный вирус создается не в клетках насекомых, а в бактериях.
- В-третьих, можно использовать рекомбинацию in vitro, то есть в пробирке. В этом случае происходит сайт-специфическая рекомбинация, когда обмен происходит в определенных участках генома и не требует большого сходства с бакуловирусной ДНК.
Рисунок 8. Схема получения рекомбинантного бакуловируса
- После встраивания рекомбинантные бакуловирусы распознают и выделяют с помощью ПЦР-скрининга или маркерных генов.
- Рекомбинантными бакуловирусами заражают культуры клеток насекомых. Самые популярные насекомые, которые используются при работе с бакуловирусной экспрессией: мотыльки Spodoptera frugiperda, тутовый шелкопряд Bombyx mori, бабочки Manduca sexta и Ectropis obliqua [12].
- Под действием вирусов клетки насекомых разрушаются. Из образовавшегося вещества — лизата — выделяют нужный белок. Тем самым мы «перерабатываем насекомых».
Рисунок 6. Схема единицы экспрессии в транспортном векторе. Нужную нам последовательность нуклеотидов встраивают в сайт клонирования (СК) между промотором (Рв) и терминатором (Тв). Перед промотором и после терминатора расположены фрагменты вирусного генома (PV).
Глава 3. Применение БЭС
Применение метода бакуловирусной экспрессии очень обширно. На данный момент он активно используется преимущественно в медицинских исследованиях.
Создание лекарств
Человечество уже нашло способы лечения многих болезней, однако в этом мире есть еще немало неизученного и (пока что) смертельного. Например, есть исследования по лечению сложных болезней, таких как рак, где используется бакуловирусная экспрессия. Уже выделяют специальные вещества, предотвращающие распространение и рост опухоли [13], вызывающие апоптоз, то есть самоуничтожение, раковых клеток [14], предотвращающие метастазирование [15].
Выделение важных для человека специфических веществ
Очень часто организм человека не производит вещества, а получает их из окружающей среды. Например, различные витамины, жирные кислоты или незаменимые аминокислоты. При каких-либо нарушениях организм не производит достаточное количество ферментов для дальнейшей нормальной жизнедеятельности. Чтобы облегчить людям течение болезни или даже вылечить их, можно производить вещества в других системах, таких как бактерии или даже растения, и вводить их извне.
С помощью бакуловирусной экспрессии можно выделять сложные, но важные для работы человеческого тела β-интерфероны [16], белки коннексины [14] и пептиды эндотелины [17].
Выделение вирусоподобных частиц для создания вакцин
Вакцинация — неотъемлемая часть современного мира. Благодаря ей число ежегодных смертей от инфекционных болезней значительно падает. Вакцина — препарат, содержащий ослабленный вирус или другой патоген целиком или его поверхностные белки, и стимулирующий работу приобретенного иммунитета по отношению к определенному антигену. Это простой способ защищаться от болезней до вступления в контакт с возбудителями. Например, уже можно выделять вирусоподобные частицы таких заболеваний, как грипп [18], гепатит Е [19] и бешенство [20].
Итак, понятно, что бакуловирусная экспрессия — это очень перспективный метод, это безопасная и удобная система для выделения сложных белков из клеток насекомых. Хочется верить, что в скором времени бакуловирусная экспрессия в России станет популярной и будет использоваться в исследованиях наравне с другими странами. Может быть, после прочтения этой статьи, вы заинтересуетесь этой темой и активно примете участие в ее развитии.
- Новиков Д.А. Выделение и очистка продуктов биотехнологии. Минск: БГУ, 2014. — 256 с.;
- Cornalia E. Monographia del bombice del gelso. Milano: Giuseppe Bernardoni di Gio, 1856. P. 348–351.;
- Bergold G.H. (1947). Comprehensive early studies on purification of baculovirus virions, confirmed that virus-like particles were occluded in polyhedral. Z. f. Naturforsch. 122–143;
- Boguslaw Szewczyk, Liliana Hoyos-Carvajal, Maria Paluszek, Iwona Skrzecz, Marlinda Lobo de Souza. (2006). Baculoviruses — re-emerging biopesticides. Biotechnology Advances. 24, 143-160;
- G E Smith, M D Summers, M J Fraser. (1983). Production of human beta interferon in insect cells infected with a baculovirus expression vector. Mol Cell Biol. 3, 2156-2165;
- Хасанов Ш.Ш., Сасмаков С.А., Абдурахманов Ж.М., Аширов О.Н.Ў., Азимова Ш.С. (2019). Бакуловирусная система экспрессии, как безопасная и эффективная система для получения рекомбинантных белков. «Universum: химия и биология», 6(60), 13–16;
- А. В. Ильиных. (2019). Вертикальная передача бакуловирусов. Изв. РАН. Сер. биол.. 321-330;
- S. N. Beljelarskaya. (2011). Baculovirus expression systems for production of recombinant proteins in insect and mammalian cells. Mol Biol. 45, 123-138;
- Moo-Young M. Comprehensive biotechnology. Elsevier B.V., 2011. — 5320 p.;
- Глик Б. и Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. М.: «Мир», 2002. — 589 с.;
- Murhamme D.W. Baculovirus and insect cell expression protocols. Humana, 2007. — 484 p.;
- Dwight E. Lynn, Robert L. Harrison. (2016). Available Lepidopteran Insect Cell Lines. Methods in Molecular Biology. 119-142;
- Yurie Kinoshita, Jian Xu, Akitsu Masuda, Kosuke Minamihata, Noriho Kamiya, et. al.. (2019). Expression and purification of biologically active human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF) using silkworm-baculovirus expression vector system. Protein Expression and Purification. 159, 69-74;
- Эдельвейс Э.Ф., Баландин Т.Г., Мишин А.В., Горделий В.И. (2010). Бакуловирусная экспрессия коннексина 26 в клетках насекомых Sf9. «Труды 53-й научной конференции МФТИ». 39–40;
- Meng-ke Fan, Guo-chuan Zhang, Wei Chen, Li-li Qi, Ming-fang Xie, et. al.. (2021). Siglec-15 Promotes Tumor Progression in Osteosarcoma via DUSP1/MAPK Pathway. Front. Oncol.. 11;
- Вагина И.Н., Аноприенко О.В., Захарук Е.А., Строковская Л.И. Перенос гена β-интерферона в клетки млекопитающих рекомбинантным бакуловирусным вектором. Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. (Т. 9), 2010. С. 219–224;
- A. V. Mishin, A. P. Luginina, A. P. Potapenko, V. I. Borshchevskiy, V. Katritch, et. al.. (2016). Expression and purification of an engineered human endothelin receptor B in a monomeric form. Dokl Biochem Biophys. 467, 157-161;
- Петухова Н.В., Иванов П.А., Мигунов А.И. (2013). Вирусоподобные частицы новая стратегия для создания противогриппозных вакцин. «Вопросы вирусологии». 58 (2), 10–14;
- Гордейчук И.В. (2014). Вакцины против гепатита E. Разработка, производство, клинические испытания. «Мир вирусных гепатитов». 4, 6–19;
- Thaissa Consoni Bernardino, Renato Mancini Astray, Carlos Augusto Pereira, Vera Lucia Boldorini, Marta Maria Antoniazzi, et. al.. (2021). Production of Rabies VLPs in Insect Cells by Two Monocistronic Baculoviruses Approach. Mol Biotechnol. 63, 1068-1080.
Комментарии
Анализ экспрессии генов с GenomeLab™ GeXP
Высокочувствительный, мультиплексный, количественный и воспроизводимый анализ экспрессии генов с использованием небольшого количества вашего образца РНК.
Как вы можете обнаружить изменения в экспрессии генов всего в 0,5 раз до 30 генов в одной реакции?
Работаете ли вы над плюрипотентностью стволовых клеток, исследованиями рака, идентификацией множественных респираторных вирусов или характеристикой бактерий и дрожжей в продуктах питания и напитках, есть вероятность столкнуться с такой задачей, как определение незначительных изменений в экспрессии ряда генов одновременно, используя малые количества образца.
Всё это возможно с помощью Системы Генетического Анализа GenomeLab ™ GeXP, благодаря мультиплексностному подходу обратной транскрипции ПЦР (XP-PCR). XP-PCR позволяет быстро и эффективно проводить мультиплексный анализ экспрессии наборов генов с большей чувствительностью, скоростью и экономичностью по сравнению с подходами на основе синглетного и мультиплексного анализа q-PCR.
Система генетического анализа GenomeLab GeXP может точно обнаруживать изменения экспрессии генов в 0,5 раз, обеспечивая более специфичный информационный поток. Благодаря уникальной, универсальной стратегии праймирования, XP-PCR позволяет анализировать несколько референсных генов, генов интереса и внутренних контролей в одной лунке. Это обеспечивает наиболее точную нормализацию и приводит к надежному обнаружению очень небольших изменений в экспрессии генов.
Система генетического анализа GenomeLab GeXP подходит для валидации мультиплексных панелей и путей изучения. Основные направления включают исследования плюрипотентности стволовых клеток, исследования рака с использованием образцов FFPE (фиксированные в формалине парафинизированные образцы), мультиплексное обнаружение микроорганизмов для идентификации респираторного вируса и определение характеристик бактерий в продуктах питания, напитках и дрожжей. GeXP также помогает исследователям, которые завершили первый этап работы с литературой или крупномасштабными технологиями скрининга. Система GeXP используется для мультиплексного, количественного анализа экспрессии генов, а также как многоцелевая платформа генетического анализа.
Преимущества генной экспрессии
- Высокопроизводительная количественная экспрессия генов. Благодаря возможности анализировать до 30 генов за реакцию GenomeLab ™ GeXP позволяет исследовать до 5760 точек данных автоматически в течение 24 часов.
- Экономия времени и экономическая эффективность экспрессии генов. Встроенная в GeXP мультиплексная мощность позволяет анализировать до 30 генов в образце при значительном снижении стоимости анализа экспрессии одного гена и немалой экономии времени.
- Высокая точность и воспроизводимость, которой cтоит доверять. Благодаря линейности (R2> 0,99 для большинства генов) GeXP обеспечивает точное профилирование экспрессии генов, что позволяет обнаруживать изменения экспрессии генов вплоть до 0,5 раз. Высокое соотношение сигнал / шум повышает чувствительность и воспроизводимость для получения более точных и информативных результатов.
- Точное представление целевых генов: не думайте, что амплифицированные продукты в вашей реакции ПЦР являются намеченной целью. Альтернативные и псевдогенные транскрипты могут быть амплифицированы гомологичными последовательностями праймеров. Разделение продуктов ПЦР по размеру с использованием капиллярного электрофореза позволяет идентифицировать и исключать нежелательные продукты, как специфические, так и неспецифические, из количественного определения. Это приводит к точному количественному определению конкретной, предполагаемой генной мишени. Это преимущество является уникальным для метода мультиплексной ПЦР с обратной транскрипцией и технологии капиллярного электрофореза, предлагаемой GenomeLabTM GeXP (XP-PCR) процессом профилирования экспрессии генов. Это приводит к наиболее точному количественному определению в мультиплексной среде.
- Низкие требования к образцу — способность к мультиплексированию в сочетании с результатами капиллярного электрофореза может быть эффективно использована для анализа целевых наборов генов, использующих всего 5-50 нг общей РНК.
- Комплексные программные инструменты — GenomeLab GeXP имеет сложный набор программных инструментов, которые помогут вам пройти путь от разработки праймеров до управления данными исследований высокопроизводительной экспрессии генов.
Мультиплексированная экспрессия генов обеспечивает высокую чувствительность и точность
- Линейность — GenomeLab GeXP предоставляет данные о генной экспрессии с превосходной линейностью. Высоколинейная корреляция между количеством РНК и уровнем экспрессии гена генерируется для каждого гена в мультиплексе со средним коэффициентом корреляции (R2) значительно выше 0,99.
- Точность — GenomeLab GeXP достаточно чувствителен, чтобы точно определять даже небольшие изменения в экспрессии генов. Увеличение концентрации РНК в 0,5 раз последовательно и точно определяет количество для всех генов в мультиплексном анализе.
- Электрофореграмма рака молочной железы человека — одновременно анализирует 24 функциональных гена, связанных с прогрессированием опухоли молочной железы, и три референсных гена (гены домашнего хозяйства).
Решения для анализа стволовых клеток — полная характеристика стволовых клеток
Для решения проблем рабочего процесса, связанных со скринингом стволовых клеток, система генетического анализа GenomeLab GeXP предлагает комплексное решение на единой платформе. Интеграция стартового набора GeXP и панели плюрипотентности для определения характеристик гена с набором GeXP STR для обнаружения загрязнения, ускоряет скрининг линий плюрипотентных стволовых клеток.
Особенности продукта GenomeLab GeXP. Профилирование экспрессии генов и анализ фрагментов
- Повышение эффективности с помощью решения интегрированного в одну платформу, использующую надежность капиллярного электрофореза: один массив, один гель и одно программное обеспечение
- Изучите более 5700 данных автоматически в день с высокой точностью относительного количественного определения 2-30 генов за реакцию
- Требование РНК на одну реакцию всего от 5 до 50 нг.
- Идеально подходит для валидации сигнатуры биомаркеров и последующего скрининга, а также для уникальных и сложных образцов, таких как колонии iPSC, одновременное обнаружение нескольких вариантов транскрипта.
Стартовый набор с панелью плюрипотентности
- Мониторинг и характеристика клеточных линий на молекулярном уровне с большей чувствительностью и специфичностью
- Сравнить методы доставки для факторов перепрограммирования
- Охарактеризовать сигнатуру биомаркера для каждого шага перепрограммирования соматических клеток и дифференциации специфических линий
- Легко определить и оценить плюрипотентную способность отдельных колоний от неиндуцированных линий
- Мониторинг плюрипотентности линий стволовых клеток
- Исключить индивидуальную маркировку праймеров с помощью универсальных наборов для амплификации
Набор для праймеров GeXP Human STR
- Повысить уверенность к источнику данных путем отслеживания клеточных линий от дифференцированного до плюрипотентного состояния и обратно к дифференцированному — мониторинг и количественное определение загрязнителей
- Использование 12 локусов для идентификации и отслеживания линий клеток человека от дифференцировки до iPSC и до повторной дифференцировки
Скрининг биомаркеров плюрипотентности следующего поколения
- Ускорьте процесс и сэкономьте время с одной системой, которая предлагает мультиплексирование с универсальной стратегией PCR праймеров
- Сэкономьте на синтезе праймеров с помощью праймера с меткой красителя, включенного в стартовый набор GeXP
- Анализ до 30 генов на реакцию с относительной количественной оценкой с непревзойденной чувствительностью и воспроизводимостью
Обслуживание и поддержка клиентов мирового уровня
- Получите техническую поддержку и апликационную поддержку в режиме онлайн, на месте и по телефону
- Установка систем и обучение методам
- Положитесь на полную поддержку оборудования, программного обеспечения и методов
Выражение Определение и значение — Merriam-Webster
выражение ·выражение ик-спре-шен
1
а
: действие, процесс или пример представления в среде (такой как слова) : высказывание
свобода слова
б(1)
: то, что проявляется, воплощает или символизирует что-то другое
этот подарок — выражение моего восхищения вами
(2)
: значимое слово или фраза
(3)
: математический или логический символ или осмысленная комбинация символов
(4)
: обнаруживаемый эффект гена
также : смысл выразительности 1
2
а
: способ, средство или использование значительного изображения или символизма
особенно : удачное или яркое указание или изображение настроения или настроения
прочитать стихотворение с выражением
б(1)
: качество или факт выразительности
(2)
: вид лица или интонация голоса, свидетельствующие о чувствах
3
: действие или продукт выдавливания
экспрессивный
ик-ˈspresh-nəl
-ˈspre-shə-nᵊl
прилагательное
Синонимы
- артикуляция
- состав
- формулировка
- выписка
- высказывание
- словесность
- голос
- формулировка
Просмотреть все синонимы и антонимы в тезаурусе
Примеры предложений
Танец является формой художественного выражения . Он использует какие-то очень странные выражения . 9Выражение 0111 «высмеивать» означает «высмеивать». Судя по ее выражению , думаю, подарок был полной неожиданностью. Мы видели, как выражение его лица изменилось с гневного на грустное. Она носила самодовольный выражение . Узнать больше
Недавние примеры в Интернете Тот факт, что Скардина не просил более явных выражение на торте имело значение. — Джек Грейнер, The Enquirer , 16 февраля 2023 г. Мода всегда была средством выражения для Вивьен, которая умерла в декабре 2022 года в возрасте 81 года. — Лили Коул, Vogue , 16 февраля 2023 г. Скала долгое время была местом в МГУ для публичного выражения , а после смертельной стрельбы в понедельник это импровизированный мемориал, в основе которого лежит множество букетов. — Фрэнк Витсил, 9 лет.0111 Detroit Free Press , 15 февраля 2023 г. Это не только обеспечивает гораздо более богатое музыкальное выражение , но также поддерживает возможность создания новых невозможных для человека тембров и звучаний с помощью 8 новых виртуозных приводов. — IEEE Spectrum , 15 февраля 2023 г. Следующий форум для творческого выражения может быть найден в маловероятном кандидате: двери вашего холодильника. — ELLE Decor , 14 фев. 2023 В Америке колледжи и университеты уже давно являются полем битвы за бесплатное выражение . — Мэтт Томпсон, SPIN , 7 февраля 2023 г. Это была одежда о стремлении к изобретательству, к творчеству, к выражению . — Рэйчел Ташджян, Harper’s BAZAAR , 3 февраля 2023 г. Интернет-пиратство — это раковая опухоль, разъедающая рынки творчества выражение . — Джон Бродкин, Ars Technica , 27 января 2023 г. Узнать больше
Эти примеры предложений автоматически выбираются из различных онлайн-источников новостей, чтобы отразить текущее использование слова «выражение». Мнения, выраженные в примерах, не отражают точку зрения Merriam-Webster или ее редакторов. Отправьте нам отзыв.
История слов
Первое известное использование
15 век, в значении, определенном в смысле 1a
Путешественник во времени
Первое известное использование выражения было в 15 веке
Посмотреть другие слова того же века
Словарные статьи Рядом с
выражениеэкспресс-автомобиль
выражение
экспрессионизм
Посмотреть другие записи поблизости
Процитировать эту запись «Выражение.
» Словарь Merriam-Webster.com , Merriam-Webster, https://www.merriam-webster.com/dictionary/expression. По состоянию на 12 марта 2023 г.Копировать цитирование
Дети Определение
Выражение
существительное
выражение ·выражение ик-ˈspresh-ən
1
: действие или процесс выражения словесно
2
а
: значимое слово или фраза
б
: математический или логический символ или комбинация символов и знаков, представляющая величину или операцию
3
: способ речи, пения или игры на инструменте, выражающий настроение или чувство
петь с выражением
4
: то, как выглядит лицо или звучит голос, выражающий чувства
довольный выражение
5
: обнаруживаемый эффект гена
невыразительный
прилагательное
невыразительно наречие
невыразительность существительное
Медицинское определение
выражение
существительное
выражение ·выражение ик-ˈspresh-ən
1
а
: то, что проявляется, представляет, отражает, воплощает или символизирует что-то другое
первое клиническое проявление болезни
б(1)
: обнаруживаемый эффект гена
также : сумма процессов (таких как транскрипция и трансляция), посредством которых ген проявляется в фенотипе
Экспрессия генов может контролироваться регуляторными белками, которые связываются со специфическими участками ДНК — Марк Пташне
(2)
: выразительность
2
: выражение лица или интонация голоса как показатель чувства
3
: действие или результат выдавливания
Юридическое определение
выражение
существительное
выражение
1
: действие, процесс или пример представления или передачи словами или каким-либо другим способом : речь
выражение, защищенное Первой поправкой
2
: способ или средство выражения идеи, мнения или мысли
Примечание: Выражение охраняется законом об авторском праве, а идея — нет.
Еще от Merriam-Webster о
expressionНглиш: Перевод expression для говорящих на испанском языке
Britannica English: Перевод expression для говорящих на арабском языке
Последнее обновление: — Обновлены примеры предложений
Подпишитесь на крупнейший словарь Америки и получите тысячи дополнительных определений и расширенный поиск без рекламы!
Merriam-Webster без сокращений
разглашать
См. Определения и примеры »
Получайте ежедневно по электронной почте Слово дня!
Сложные стандартизированные тестовые слова, Vol. 2
- Новая компьютерная система предприятия оказалась не панацеей .
- Препятствие Панацея
- Дорогостоящее бремя Безопасное пространство
Проверьте свои знания и, возможно, узнаете что-нибудь по ходу дела.
ПРОЙДИТЕ ТЕСТ
Сможете ли вы составить 12 слов из 7 букв?
PLAY
10 английских выражений и их значений
Изучая новый язык, мы обычно сначала концентрируемся на изучении основ — грамматики и лексики. Хотя это действительно важно — и именно об этом мы говорим на наших онлайн-курсах английского языка — также важно учить идиомы, выражения и общеупотребительные фразы при изучении языков.
Это поможет вам выйти за рамки грамматически правильных слов, так вы будете звучать как носитель языка и получите представление о культуре людей, говорящих на этом языке. При изучении любого нового языка важны фразы и выражения, поэтому давайте взглянем на некоторые наиболее часто используемых английских выражений :
Вот 10 английских выражений, которые необходимо знать, и их значения
1. Лучшее после нарезанного хлеба
Справедливости ради следует отметить, что это выражение не обязательно используется очень часто, но оно оказывает тем большее влияние, когда оно используется. Этот «титул» следует присуждать только великим идеям или инновациям, желательно более гениальным, чем изобретение предварительно нарезанного хлеба. Я, например, не слишком уверен, что такого хорошего в нарезанном хлебе. Нарезать хлеб не так уж и сложно, а ненарезанная буханка остается свежей еще день или два…
2. Вызов принят
Это выражение приобрело популярность благодаря тому, что Нил Патрик Харрис постоянно использовал его в роли Барни Стинсона в Телепередача «Как я встретил вашу маму». Его можно использовать по-разному, но наиболее уместно, когда кто-то утверждает, что что-то невозможно или не следует делать по какой-то причине. Пример: «Ты никогда не сможешь съесть весь этот торт!» — «Вызов принят!»
3. Пересеките этот мост, когда доберетесь до него
Это полезное выражение очень любят прокрастинаторы, потому что это удобный способ отсрочить или избежать встречи с проблемой! Если кто-то указывает на возможную будущую проблему, вы можете просто отмахнуться от него, сказав: «Мы перейдем этот мост, когда до него доберемся»; буквально означает «Я не хочу думать об этом сейчас. Будем надеяться, что этого не произойдет, но если это произойдет, тогда мы решим проблему».
4. Не кладите все яйца в одну корзину
У вас есть друг, который считает себя начинающим писателем и подумывает бросить свою основную работу, чтобы писать полный рабочий день, чтобы закончить «роман века»? Возможно, вы захотите сказать ему, чтобы он не «клал все яйца в одну корзину». Большинство людей, вероятно, держат свои яйца в холодильнике… но это выражение используется, когда мы хотим предостеречь других от того, чтобы они не полагались только на одну возможность — оставить свои варианты открытыми. Однако, если вы писатель, и ваши друзья говорят вам это, вам следует либо отказаться от этого романа, либо найти себе новых друзей!
5. Голландское мужество
«Голландское мужество» — это скорее эвфемизм пьяной храбрости. Если перед вами стоит неудобная задача, с которой, по вашему мнению, можно справиться только с «голландской храбростью», это означает, что вы предпочтете быть пьяным (или, по крайней мере, немного навеселе) при выполнении указанной задачи. Это английское выражение особенно актуально для изучения языка , так как теперь даже ученые признали, что несколько стаканов выпивки могут помочь вам свободно говорить на любом языке, который вы выучили. Но будьте осторожны, чтобы не переусердствовать; полная потеря речи была связана с крайним пьянством!
Здесь, чтобы улучшить свой английский?
Начните учиться с Busuu, отмеченным наградами приложением для изучения языков.
Начать обучение
6. В запале
Вы когда-нибудь слышали, как кто-нибудь говорил, что что-то произошло «в запале», и задавались вопросом, какое отношение к этому имеет температура? Это выражение используется, чтобы объяснить, что решение или действие было принято в гневе или страсти и что, оглядываясь назад, это могло оказаться не самой логичной идеей или лучшим выбором. Это очень хорошо работает в качестве оправдания, если вы сожалеете о том, что приняли опрометчивое решение или сказали что-то немного грубое.
7. Держите что-нибудь под контролем
Это английское выражение можно использовать, если вы выпиваете стакан убивающего микробы виски или превентивное лекарство от простуды и гриппа, когда чувствуете приближение простуды — вы бы попытались чтобы не простудиться! И если вы в конечном итоге почувствуете себя лучше и выпьете еще несколько стаканов виски, то большое количество воды и аспирин предотвратят завтрашнее похмелье. Это выражение действительно работает во многих отношениях…
@busuu Some of the most used sentences in day 2 day English ⬆️⬆️ #english #learnenglish #englishlanguage #englishclass #englishlesson #speakenglish #englishspeaking #funenglish #ingles #inglese #Busuu
♬ MOMENTS IN LIFE — Turreekk
8. Короче говоря
Мы все знаем кого-то, кто любит гулять. Они пытаются донести мысль, но вместо этого:
- расходятся с точкой,
- приукрасить историю слишком подробно,
- и, следовательно, не добраться до указанной точки.
Иногда они могут понять, что делают, и быстро прервать поток своей болтовни, используя выражение «короче говоря». Обычно к этому моменту вы перестаете слушать, так что это хороший способ получить краткое изложение их истории…
9. Украсть чей-то гром
Это английское выражение немного сложно объяснить, поэтому давайте попробуем на примере: может быть, у вас есть новости, которые вы очень рады сообщить людям. Если бы кто-то другой сообщил о своих новостях раньше ваших, они бы украли ваш успех. Это также работает наоборот. Если бы вы только что поделились своими важными новостями с группой друзей, а другой друг пришел бы поделиться своими новостями, тем самым прервав правильную реакцию на ваши новости, они бы украли ваш гром. Не круто.
10. Ваша догадка так же хороша, как и моя
Хорошее выражение для завершения этого списка! Если кто-то задает вам вопрос, на который вы не можете ответить, но не хотите говорить что-то глупое, например, «я не знаю», скажите вместо этого: «Ваше предположение так же хорошо, как и мое».