Джон Локк цитаты (191 цитат)
47 288
Дата рождения: 29. Август 1632
Дата смерти: 28. Октябрь 1704
Джон Локк — английский педагог и философ, представитель эмпиризма и либерализма. Способствовал распространению сенсуализма. Его идеи оказали огромное влияние на развитие эпистемологии и политической философии. Он широко признан как один из самых влиятельных мыслителей Просвещения и теоретиков либерализма. Письма Локка произвели воздействие на Вольтера и Руссо, многих шотландских мыслителей Просвещения и американских революционеров. Его влияние также отражено в американской Декларации независимости.
Теоретические построения Локка отметили и более поздние философы, такие как Дэвид Юм и Иммануил Кант. Локк первым из мыслителей раскрыл личность через непрерывность сознания. Он также постулировал, что ум является «чистой доской», то есть, вопреки декартовской философии, Локк утверждал, что люди рождаются без врождённых идей, и что знание вместо этого определено только опытом, полученным чувственным восприятием.
Wikipedia
Фото: Godfrey Kneller, State Hermitage Museum, St. Petersburg, Russia. / Public domain
„Ничто не проникает так незаметно и глубоко в душу человека, как пример: какую бы дурную черту люди не проглядели в себе и не прощали себе самим, она может внушать им только отвращение и стыд, когда выступает перед ними в других людях.“
— Джон Локк
„Скажите страстно влюблённому мужчине, что возлюбленная обманывает его, представьте ему двадцать свидетелей неверности его возлюбленной, и можно держать пари, ставя десять против одного, что несколько любезных слов её опровергнут все свидетельства обвинителей.“
— Джон Локк
„Поступки человека — лучшие переводчики его мыслей.“
— Джон Локк
Действия людей — лучшие переводчики их мыслей.
„Если строгость и приводит к исцелению от скверной наклонности, то этот результат часто достигается за счет насаждения другого, еще худшего и более опасного недуга — душевной пришибленности.“
— Джон Локк
„Едва ли есть что-либо более нужное для знания, для спокойной жизни и для успеха всякого дела, чем умение человека владеть своими мыслями.
“
— Джон Локк
„Счастье или несчастье человека в основном является делом его собственных рук.“
— Джон Локк
„Правильно мыслить более ценно, чем многое знать.“
— Джон Локк
„В дурно воспитанном человеке смелость принимает вид грубости; учёность становится в нем педантизмом; остроумие — шутовством, простота — неотёсанностью, добродушие — льстивостью.“
— Джон Локк
„Воспитатель должен обладать хорошим знанием света, знанием обычаев, нравов, причуд, плутней и недостатков своего времени, в особенности страны, в которой он живет. Он должен уметь показать их своему воспитаннику… должен научить его разбираться в людях… срывать маски, накладываемые на них профессией и притворством, различать то подлинное, что лежит в глубине под такой внешностью… Он должен приучать своего воспитанника составлять себе, насколько это возможно, правильное суждение о людях на основании тех признаков, которые лучше всего показывают, что те представляют собой в действительности, и проникать своим взглядом в их внутреннее существо, которое часто обнаруживается в мелочах, в особенности когда эти люди находятся не в парадной обстановке и не начеку. “
— Джон Локк
„Вежливость — первая и самая приятная добродетель.“
— Джон Локк
„Никого нельзя заставить быть богатым или здоровым вопреки его воле.“
— Джон Локк
„Ни в одной области разум не нуждается в более тщательном и осторожном руководстве, чем в пользовании книгами.“
— Джон Локк
„Единственный способ защититься от внешнего мира — это глубоко его познать.“
— Джон Локк
„Чем раньше вы начнете относиться к своему сыну как к мужчине, тем раньше он им станет.“
— Джон Локк
„Истинное мужество выражается в спокойном самообладании и в невозмутимом выполнении своего долга, невзирая ни на какие бедствия и опасности.“
— Джон Локк
„Мужество — страж и опора всех остальных добродетелей, и тот, кто лишен мужества, вряд ли может быть твердым в исполнении долга и проявить все качества истинно достойного человека.“
— Джон Локк
„Родители, поощряя капризы детей и балуя их, когда они малы, портят в них природные задатки, а потом удивляются, что вода, источник которой они сами, отравили, имеет горький вкус. “
— Джон Локк
„Никто не знает силы своих способностей, пока он не испытал их.“
— Джон Локк
„Образование создаёт разницу между людьми.“
— Джон Локк
„Порок не в том, чтобы иметь желания, а в неумении подчинить их правилам разума; дело не в том, испытываете ли вы или не испытываете самих влечений, а в способности управлять ими и отказываться от них.“
— Джон Локк
Подобные авторы
Джон Локк и его философия : neznakomka_18 — LiveJournal
.
Мой комментарий:
Я уже писала об этом чуть раньше, комментируя фильм «Лок», но повторюсь: интерес к философии Джона Локка возник у меня в тот момент, когда я увидела параллель с главным героем этого фильма, Айваном Локом. Некоторые зрители отметили сходство имен и решили, что это неспроста. Меня заинтересовала эта взаимосвязь и мне захотелось узнать больше о взглядах реального Локка, тем более, что на протяжении всего фильма экранный герой Лок только тем и занимается, что решает проблему выбора.
И не между главными и второстепенными вещами, а между одним главным делом, другим главным и третьим главным. Да, и такое бывает. И когда говорят некоторые, что всегда можно выстроить приоритетную оценочную шкалу, на которую можно ориентироваться, чтобы сделать правильный выбор, то вот этот самый фильм — наглядное пособие, показывающее, что иногда одинаково важным бывает все, и тогда единственно правильного выбора не существует. И при любом выборе платится очень высокая цена.
Все это очень любопытно, но я не очень понимала, причем здесь настоящий Локк и его философия, если он и правда имеет отношение к нашему герою.
Рассказывая на днях своим домашним об этом фильме, я задала им вопрос:» Кто знает что-то о Локке и кто может в трех словах сформулировать его философию применимо к данному фильму?» И тут мой сын, от которого я меньше всего ожидала какой-либо реакции, моментально дал мне ответ (по-английски из трех слов, по-русски будет из двух) : » Свобода выбора (freedom of choice)».
( Кстати, спасибо классу философии, который берет сейчас мой сын в колледже, за эти знания, хотя и учится он на программиста!)
После этого мне стало стыдно, но и интересно вдвойне. И я стала искать информацию. Но выкладывать, как и читать, целиком любую статью о Локке — это непростое занятие. Без подготовки разбираться в его философии очень трудно. Поэтому я из десятка прочитанных мной статей, посвященных ему, отобрала несколько относительно не сложных для понимания цитат, которые могут помочь познакомиться ближе и с ним, и с его взглядами. А также определить, существует ли взаимосвязь двух Лок(к)ов или это не более чем совпадение имен.
****************************************
Английский философ, общественный и государственный деятель, представитель эмпиризма и либерализма. Критиковал религиозную нетерпимость и понятие субстанции, отвергал теорию врожденных идей, а также божественное право королей.
Сформировал собственную теорию идей, государственного устройства и теорию познания.
ЛОКК, ДЖОН (Locke, John) (1632–1704), Выдающийся английский философ, педагог, ученый, врач и политик родился в семье состоятельного адвоката. Джон Локк окончил Оксфордский университет, в котором позже стал профессором греческого языка и риторики. Кроме стационарного обучения он усердно занялся самообразованием, благодаря чему стал наиболее образованным человеком своего времени. Его иногда называли «интеллектуальным вождем 18 в.» и первым философом эпохи Просвещения.
***
Локк оказал огромное влияние на европейских мыслителей последующего поколения. … На его работы опирались идеологи Северных Штатов Америки, в том числе Джордж Вашингтон и автор «Декларации независимости» Томас Джефферсон. Таким образом, в лице Локка мы имеем философа, чьи работы стали поворотной вехой в развитии экономических, политических, этических идей в Европе и Америке.
Идеи Локка по достоинству оценили уже в конце его жизни. В последние годы Локк издал практически все свои труды, которые так или иначе впоследствии повлияли на Вольтера, Жан-Жака Руссо, Давида Юма и других умнейших представителей человечества.
***
Мировую культуру Джон Локк обогатил рядом важнейших научных открытий социально-политических учений, педагогических разработок.
Так он обосновал необходимость разделения власти на законодательную и исполнительную.
В годы жестоких религиозный воен он доказывал необходимость свободы совести и веротерпимости («Письма о веротерпимости»), заложил основы педагогики («Мысли о воспитании»). Значительным философским достижением философа было его учение о познании, которому он посвятил свое главное произведение: «Очерки о человеческом разуме».
***
В свое работе Два трактата о государственном правлении (Two Treatises of Government, 1689, в книге проставлен год издания 1690) Локк изложил теорию революционного либерализма.
В этой книге он выдвинул концепцию общественного договора, по которой единственным истинным основанием власти суверена является согласие народа. Если правитель не оправдывает доверия, люди имеют право и даже обязаны перестать ему подчиняться. Иначе говоря, люди имеют право на восстание. Но как решить, когда именно правитель перестает служить народу? Согласно Локку, такой момент наступает, когда правитель переходит от правления, основанного на твердом принципе, к «переменчивому, неопределенному и произвольному» правлению.
***
В Письме о веротерпимости Локк выступил против традиционного взгляда, согласно которому светская власть вправе насаждать истинную веру и истинную мораль.
Сам Локк был христианином и придерживался англиканства. Но его личный символ веры был удивительно краток и состоял из одного-единственного суждения: Христос – Мессия. В этике он был гедонистом и верил, что естественной целью человека в жизни является счастье, а также что Новый завет указал людям путь к счастью в этой жизни и жизни вечной. Свою задачу Локк видел в том, чтобы предостеречь людей, ищущих счастье в кратковременных удовольствиях, за которые впоследствии приходится платить страданием.
***
Вера, в его понимании, есть проявление креативной силы Господа. … и никакими гносеологическими потребностями человека невозможно объяснить ее появление. Следует отметить, что Локк выдвинул свой вариант космологического доказательства бытия Божьего, правда, повторив во многом схему рассуждений Ньютона, который считал, что помимо Бога невозможно найти никакого источника активности материи и сознания. Локк резко отрицательно относился к атеистам и даже предлагал лишить их гражданских прав, ибо атеисты с его точки зрения, будучи прирожденными скептиками, утрачивают способность к повиновению, ни во что не ставят государство и, в конечном счете, морально деградируют, становясь опасными для других, законопослушных и богобоязненных, индивидов.
Справедливости ради необходимо сказать, что, будучи деистом по своим религиозным убеждениям, Локк не считал, что вера обладает Правом приоритета перед научной мыслью. Более того, он настаивал, что все непонятное разуму должно быть отвергнуто. … (Деизм — религиозно-философское направление, признающее существование Бога и сотворение Им мира, но отрицающее большинство сверхъестественных и мистических явлений, Божественное откровение и религиозный догматизм — мое дополнение)
***
Можно без преувеличения сказать, что Локк был первым современным мыслителем. Его способ рассуждения резко отличался от мышления средневековых философов. Сознание средневекового человека было наполнено мыслями о нездешнем мире. Ум Локка отличался практичностью, эмпиризмом, это ум предприимчивого человека, даже обывателя: «Какова польза, – спрашивал он, – от поэзии?» Ему не хватало терпения разбираться в тонкостях христианской религии. Он не верил в чудеса и с отвращением относился к мистике.
***
Главная философская заслуга Локка в истории философской мысли заключается в развитии и обосновании им сенсуалистической теории познания. Прежде всего Локк выступил с опровержением платоновско-картезианского учения о врожденных идеях. Он доказывал, что в разуме нет ничего такого, чего не было бы в ощущениях. Разум новорожденного, говорил философ и педагог, — это “Tabula rasa” (Чистая доска), на которой опыт записывает свои чувствования. Все знания, по Локку, приобретаются из опыта. Отсюда Локка вслед за его предшественников Френсисом Беконом называют эмпириком.
***
Локк переосмыслил понятие «идеал человека». Конечной целью воспитания, «окулътуренности» индивида, с его точки зрения, должна быть не всесторонне и гармонически развитая личность, а человек, обладающий безупречными манерами, практичный по складу характера, умеющий властвовать над своими страстями и эмоциями.
Говоря другими словами, человеческий идеал — это английский джентльмен со всеми присущими ему личностными характеристиками.
Локк в двух своих трактатах о воспитании самым подробным образом рассказывает о том, что должен есть и пить ребенок, в какую одежду его предпочтительнее одевать, как надо развивать его таланты и способности и препятствовать проявлению дурных наклонностей, как уберечь его от тлетворного влияния слуг, в какие игры он должен играть и какие книги он должен читать и т.д. Стоит отметить, что педагогические воззрения Локка явно опережают его время. Например,
Возражает Локк и против широко распространенной в те времена практики мелочной регламентации поведения ребенка. Он считает, что юное существо просто не в состоянии запомнить многочисленные правила, которые предписывает этикет, а потому добиваться от него их запоминания с помощью телесных наказаний просто неразумно и предосудительно с этической точки зрения. Локк убежден, что ребенок должен быть естественен в своих проявлениях, что ему не нужно копировать в своем поведении взрослых, для которых соблюдение этикета есть необходимость, а знание норм поведения в той или иной ситуации представляет своеобразный показатель, отличающий воспитанного человека от невоспитанного. «Пока дети малы, — пишет Локк, — отсутствие в них светской учтивости в обращении, если им только свойственна внутренняя деликатность,… должно меньше всего заботить родителей» . Главное, к чему должен стремиться воспитатель, утверждает Локк, — это сформировать у ребенка представление о чести и стыде. «Если вам удалось, — пишет он, — научить детей дорожить доброй репутацией и страшиться стыда и позора, значит, вы вложили в них правильное начало, которое всегда будет проявлять свое действие и склонять их к добру.
.. В этом я вижу великий секрет воспитания» .
Говоря о методах, Локк подчеркивает, что усилия воспитателя тогда приносят успех, если между ним и воспитуемым существует, доверие и уважение друг к другу. Он пишет: «Кто желает, чтобы его сын относился с уважением к нему и его предписаниям, тот должен сам относиться с большим уважением к своему сыну». Подобная постановка вопроса о взаимоотношениях воспитателя и воспитуемого была чрезвычайно радикальна для того времени, и многие упрекали Локка в том, что своими рассуждениями он крушит традиции и подрывает авторитет учителей.
***
Локк стоял у истоков трудовой теории стоимости, которую использовал для апологетики буржуазного общества и доказательства незыблемости права частной собственности. Он первым провозгласил, что «собственность, возникшая благодаря труду, может перевесить общность владения землей, ведь именно труд создает различия в стоимости всех вещей».
***
Локк отмечает весьма значительную роль страдания и удовольствия среди идей, получаемых от ощущения и рефлексии.
Добро и зло также выводятся из удовольствия и страдания: «Добром мы называем то, что способно вызвать или увеличить наше удовольствие либо уменьшить наше страдание или же обеспечить либо сохранить нам обладание каким-нибудь другим благом или же отсутствие какого-нибудь зла. Злом, напротив, мы называем то, что способно причинить нам или увеличить какое-нибудь страдание, либо уменьшить какое-нибудь удовольствие, или же доставить нам какое-нибудь неудовольствие, либо лишить нас какого-нибудь блага» . Все человеческие страсти вращаются одного стержня – это «удовольствие и страдание и то, что их вызывает, – добро и зло». Однако удовольствие и страдание воздействую на поведение человека не непосредственно. Опосредствующим звеном является беспокойство.
Определяет волю не само благо или зло, «а некоторое беспокойство (и по большей части наиболее гнетущее), которое человек испытывает в данный момент» из-за отсутствия (недостатка) блага, либо в целях избавления от страдания.
«Всякий человек всякий жаждет счастья», т.е. наивысшего удовольствия, а «устранение беспокойства есть первый шаг к счастью». Беспокойство по поводу ожидаемого зла оказывает на человека более непосредственное воздействие, определяя его поведение, чего не скажешь об ожидании блага.
***
Итак, человек действует свободно, когда он руководствуется решением разума: «свобода человека и свобода поступать по его собственной воле основываются на том, что он обладает разумом, который в состоянии научить его тому закону, по которому он должен собой управлять, и дать ему понять, в какой степени у него остается свобода его собственной воли». Если отвести вопрос о том, может ли ошибаться разум (как не имеющий ответа в теории Локка), то, тем не менее, остаётся другой не менее важный вопрос – всегда ли человек способен (настроен) руководствоваться разумом? (Хороший вопрос!) На данный вопрос Локк отвечает отрицательно.
Поведение человека определяется не только разумно понятым благом или даже высшим положительным благом (иначе «бесконечно большее возможное благо регулярно и постоянно определяло волю во всех… действиях и не было бы необходимости в иных регуляторах поведения человека).
Однозначно рационалистическая трактовка сущности человека оказывается не в состоянии объяснить многообразие человеческого поведения. Разрешение противоречия – разумная природа человека и его не всегда разумное поведение – осуществляется Локком по пути, намеченному его старшим соотечественником Гоббсом. Локк вынужден признать, что «беспокойство желания» может определять волю, невзирая на соображения разума. «Правда, добро и зло, наличествуют они или отсутствуют, действуют на ум. Но то, что время от времени непосредственно определяет волю на совершение каждого произвольного действия, есть беспокойство желания, направленного на какое-нибудь отсутствующее благо – или отрицательное, какова безболезненность для страдающего, или положительное, каково наслаждение от удовольствия».
В каждый «… момент мы способны принять лишь одно решение воли к действию, поэтому беспокойство, переживаемое нами в данный момент, естественно, определяет волю для того, чтобы достичь того счастья, к которому мы стремимся…» .
Несмотря на провозглашение активной способности ума определять своё содержание и свой выбор, Локк вынужден отступить. Он указывает: «наиболее важное и сильное беспокойство, испытываемое нами в данный момент, есть то, что обыкновенно определяет волю к последовательному ряду произвольных действий».
Человек, будучи существом разумным, способен следовать велениям разума для достижения блага или даже высшего блага, но делает это, по крайней мере, непоследовательно. Но что есть благо (счастье), и что есть высшее благо? Если каждый решает этот вопрос для себя, руководствуясь соображениями пользы (удовольствия или страдания), то исчезает всякая основа для общих для всех законов нравственности. Следовательно, необходимо сделать вывод о наличии неких объективных, вне и помимо человека существующих законов, которые должны определять его поведение.
Нравственные отношения состоят «в согласии или несогласии сознательных действий людей с правилами, к которым эти действия относятся и по которым судят о них».
Локк называет их «нравственными отношениями, потому что они дают наименование нашим нравственным действиям…». Независимо от того, что мы определим в качестве нормы (божественный закон, обычаи страны или волю законодателя), указывает Локк, «понятие нравственного добра или зла, которое есть сообразность или несообразность какого-нибудь действия с правилом или нормой и потому называется часто нравственной справедливостью».
В таком случае нравственное добро и зло есть «лишь согласие или несогласие наших сознательных действий с некоторым законом, по которому, согласно воле и власти законодателя, нам делают добро или причиняют зло, причем эти добро и зло, удовольствие или страдание, которые по велению законодателя ожидают нас за соблюдение или нарушение закона, мы называем наградой и наказанием» .
***
Свобода рассматривается Локком как отсутствие подчинения, несвязанность человека. Однако любая свобода предусматривает подчинение закону.
«Естественная свобода человека заключается в том, что он свободен от какой бы то ни было стоящей выше его власти на земле и не подчиняется воле или законодательной власти другого человека, но руководствуется только законом природы». Аналогичным образом свобода в обществе и государстве («в условиях существования системы правления») определяется как подчинение только лишь законодательной власти, установленной «по согласию в государстве», и её законам. Другими словами, «это – свобода следовать моему собственному желанию во всех случаях, когда этого не запрещает закон, и не быть зависимым от непостоянной… воли другого человека».
Вот она, связь с Айваном Локом! И фильм этот — не столько о проблеме выбора, получается. Он о свободе делать собственный выбор. Ведь герой, на самом деле, сделал свой выбор в первую же минуту фильма, а потом только тем и занимался, что защищал его от давления других людей. Спасибо Локку, сейчас, как мне кажется, я поняла фильм и его героя гораздо глубже.
Спасибо и экранному Локу — за жизненный урок и за удовольствие от знакомства с его тезкой!
|
В 1666 г. он вошел в дом Энтони Эшли Купера, первого графа Шефтсбери, где приобрел интерес к политическим и экономическим вопросам. Осторожное участие Локка в политике вынудило его в 1680-х годах провести недолгое время в изгнании в Голландии, пока король Яков II не отрекся от престола и на британский трон не взошли Вильгельм III и Мария Оранские. Локк был известен как философ и государственный служащий. Частью его вклада в общественную жизнь была организация Торговой палаты в 1695 г. и последующая служба в качестве уполномоченного палаты вплоть до 1700 г.
Хотя это сочинение, слишком сложное и аналитическое для того, чтобы повлиять на обсуждение, не смогло убедить парламент, именно его непригодность как средства политического убеждения делают его интересным для истории экономической мысли.
Меновая ценность зависит исключительно от пропорции между количеством блага, предлагаемого к продаже, и возможностями его сбыта — величиной спроса. Те же принципы применялись к ценности денег. Деньги были специальным товаром, обладающим двоякой ценностью: потребительной и меновой. Потребительная ценность денег происходила от их функции денежного капитала, ценой которого была ставка процента. Ставка процента тем самым зависела не от законодательства, но от прибыльности инвестиций и доступных индивидам альтернативных способов использования денег. Меновая ценность денег, однако, представляла собой особый случай ценности товаров, поскольку в то время как их количество являлось переменным, возможности сбыта денег были «всегда достаточными» (Some Considerations, p. 71) — под этим Локк понимал то, что люди согласны иметь любое количество денег в обращении. Следовательно, доказывал он, ценность денег, или их покупательная способность, выражалась исключительно обратной функцией от количества денег в обращении.
Количество денег, однако, также зависело от их «быстроты обращения» (Ibid., р. 33), которую он представлял функцией существующих в обществе относительно стабильных привычек людей расплачиваться. В анализе Локка легко заметить раннюю формулировку количественной теории денег.
Иными словами, он предполагал, что изменения денежного предложения влияют на выпуск, что заставляло его отвергать ставки на механизм цен и денежных потоков как способ поддержания торгового баланса.
Хотя это, возможно, и справедливо, на самом деле Локк намеревался заявить, что деньги являлись частной собственностью граждан, а не созданием правительства. Он выдвигал моральный аргумент, согласующийся с политической философией, которую излагал во Втором трактате о гражданском правлении.
His¬tory of Political Economy 6. Summer, 200— 19.Доктор Джон Джордж Лок | UNSW Research
Научные интересы
Лаборатория системной микроскопии рака (CSM) стремится внести свой вклад в улучшение результатов лечения рака путем продвижения:
- прецизионной диагностики; использование уникального набора методов визуализации для диагностики факторов, вызывающих рак у отдельных пациентов, что позволяет точно использовать существующие таргетные методы лечения
- Использование автоматизированной мультиплексной количественной визуализации («протеомная микроскопия») циркулирующих опухолевых клеток для диагностической/прогностической сигнализации рака анализ с сотрудниками (д-ром Терезой Беккер) из Института прикладных медицинских исследований Ингама
- Таргетная терапия; с помощью новой высококонтентной стратегии для обнаружения и диверсификации направлений терапии рака, поддерживая ускоренную разработку новых целевых методов лечения
- Использование статистического и машинного анализа крупномасштабных исследований фенотипического скрининга лекарств на основе изображений
- Фундаментальные идеи; развертывание междисциплинарных методов для анализа основных механизмов, лежащих в основе прогрессирования рака, и поиск новых уязвимых мест в раке человека
- Включая разработку инструментов статистики, машинного обучения и визуализации данных (вместе с UNSW EPICenter) для опроса, интерпретации и передачи многомерных данных, полученных из количественной визуализации отдельных клеток
Основные исследовательские технологии лаборатории CSM вращаются вокруг концепции системной биологии на основе изображений, также известной как системная микроскопия.
В результате лаборатория использует междисциплинарный подход, охватывающий новые аспекты планирования экспериментов, автоматизации экспериментов, автоматизированной визуализации, количественного анализа изображений, статистического анализа, машинного обучения и визуализации данных/визуальной аналитики.
Это основано на новаторских усилиях по первоначальной концепции системной микроскопии как исследовательской стратегии, предназначенной для воспроизведения масштабируемости, воспроизводимости и количественной строгости существующих методов биологии одноклеточных систем («Омики»), а также включает критические размеры пространства и время в молекулярный анализ клеточной регуляции и функции. Системная микроскопия представляет собой не только мощный подход к фундаментальным исследованиям в области клеточной биологии, но и использует высокие характеристики отношения сигнал-шум (иммуно)-флуоресцентной визуализации, чтобы обеспечить мощную альтернативу / дополнение к существующим стратегиям золотого стандарта для точной медицины, а также для открытия лекарств.
Ниже мы описываем ряд основных проектов, разрабатываемых в лаборатории.
Анализ циркулирующих опухолевых клеток для точной диагностики
Мы стремимся обеспечить точную медицину при раке путем революционного анализа сигналов, управляющих прогрессированием заболевания и устойчивостью к терапии. С помощью продольно отобранных циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК), проанализированных с помощью протеомной микроскопии, мы визуализируем до 50 маркеров на ЦОК для количественной оценки активности нескольких сигнальных путей, связанных с резистентностью. Используя искусственный интеллект (ИИ) для анализа этих данных, мы классифицируем устойчивые виды рака по их сигнальным драйверам и обучаем модели, предсказывающие механизмы устойчивости. Это определяет сигнатуры биомаркеров, которые могут помочь в стратификации пациентов для таргетной терапии. Начиная с акцента на рак простаты, эта стратегия точной диагностики может быть распространена на целый ряд видов рака.
Беспристрастное открытие лекарств для разработки таргетной терапии
Совместно с сотрудниками UNSW Medicine профессорами Питером Ганнингом и Эдной Хардеман (CGMU) мы разработали и протестировали новую стратегию обнаружения потенциальных лекарств, которая включает фенотипический скрининг крупных масштабные библиотеки лекарств (более 100 000 соединений на сегодняшний день) с помощью высокопроизводительной визуализации, количественного анализа изображений и многомерного статистического анализа данных / машинного обучения для выявления структурно и механически разнообразных соединений с желаемыми биологическими эффектами. Мы уже использовали его для изучения фенотипической пластичности актинового цитоскелета и в то же время для выявления новых актин-регулирующих соединений, теперь мы работаем над обобщением этого подхода, чтобы ускорить открытие ведущих соединений в рамках разработки лекарств.
Протеомный микроскопический анализ субклеточной передачи сигналов
Путем последовательного иммунофлуоресцентного мультиплексирования маркеров субклеточной передачи сигналов и регуляторных белков мы стремимся реконструировать биологию сигнальных систем in situ в отдельных клетках.
Преодолевая разрыв между подходами к моделированию биологии вычислительных систем и зашумленной сложностью сигнальных систем, пространственно распределенных в гетерогенных клетках, этот подход может значительно улучшить наше понимание конкурентной регуляции сигналов в четырех измерениях пространства и времени. Сохраняя наше традиционное внимание к биологии передачи сигналов адгезии в поляризованных и мигрирующих клетках, мы стремимся применить этот подход для изучения фундаментальных процессов и динамики клеточной самоорганизации.
Последние избранные публикации
Машинное обучение в медицинской визуализации. MLMI 2021. Lecture Notes in Computer Science, vol 12966, pp. 487–497. Springer International Publishing
DOI: https://doi.org/10.1007/978-3-030-87589-3_50
Данные скрининга на основе микроскопических изображений широко используются в профилировании клеток для характеристики разнообразия клеточных фенотипов и извлечения объяснительных биомаркеров, дифференцирующих клеточные фенотипы, вызванные экспериментальными возмущениями или болезненными состояниями.
В последние годы для интерпретации данных профилирования ячеек все чаще применяются высокопроизводительные методы встраивания многообразия, такие как t-распределенное стохастическое встраивание соседей (t-SNE), аппроксимация и проекция равномерного многообразия (UMAP) и генеративные сети. Однако результирующие представления могут не использовать всю информацию об изображении, поскольку эти методы обычно применяются к количественным характеристикам изображения, определенным экспертами-людьми. Здесь мы предлагаем новую структуру для анализа данных профилирования клеток, основанную на двухэтапном обучении с глубоким представлением с использованием вариационных автоэнкодеров (VAE). Мы представляем количественные и качественные оценки изученных представлений клеток на двух наборах данных. Результаты показывают, что наша структура может давать лучшее представление, чем популярные в настоящее время методы. Кроме того, наша структура предоставляет исследователям более гибкий инструмент для анализа основных фенотипов клеток и эффективной интерпретации автоматически определенных характеристик клеток.
Перспектива выявления механизмов резистентности кастрационно-резистентного рака предстательной железы с использованием циркулирующих опухолевых клеток: эпителиально-мезенхимальный переход играет ключевую роль?
Танзила Хан, Киран Ф. Скотт, Тереза М. Беккер, Джон Лок , Мохаммед Нимир, Яфенг Ма, Пол де Соуза
Рак простаты, том 2020, идентификатор статьи 7938280
DOI: https://doi.org /10.1155/2020/7938280
Рак предстательной железы (РПЖ) изначально вызывается избыточной передачей сигналов рецепторами андрогенов (АР), при этом основным терапевтическим подходом к его лечению является андрогенная депривация (АДТ). Однако развитие лекарственной устойчивости является существенным ограничением эффективности как первого ряда, так и недавно разработанного второго ряда. Затем необходимо изучить передачу сигналов AR в контексте других онкогенных путей передачи сигналов, которые, вероятно, опосредуют эту резистентность. Этот обзор посвящен взаимодействию между передачей сигналов AR, хорошо известным путем фосфатидилинозитол-3-киназы/AKT и новым медиатором этих путей, осью Hippo/YAP1 при метастатическом кастрационно-резистентном РПЖ, а также их участием в регуляции эпителиального -мезенхимальный переход (ЕМТ), особенность прогрессирования заболевания и резистентность к АДТ.
Анализ этих путей в циркулирующих опухолевых клетках (ЦОК) может дать возможность оценить их полезность в качестве биомаркеров и рассмотреть их важность в развитии резистентности к текущей АДТ с потенциалом для определения будущих методов лечения.
Высококонтентная визуализация несмещенных химических возмущений показывает, что фенотипическая пластичность актинового цитоскелета ограничена.
Брайс Н.С., Фейлес Т.В., Стен Дж.Р., Бейкер К., Захлер С., Аржаева Ю., Бишоф Л., Лайонс С., Дедова И., Арндт Г.М., Гаус К., Гулт Б.Т., Хардеман Э.К., Ганнинг П.В., Лок JG .
Сотовые системы . 2019-09
DOI: 10.1016/j.cels.2019.09.002
Хотя F-актин имеет большое количество партнеров по связыванию и регуляторов, количество фенотипических состояний, доступных для актинового цитоскелета, неизвестно. Здесь мы количественно оценили 74 признака, определяющие филаментозный актин (F-актин) и клеточную морфологию в более чем 25 миллионах клеток после обработки библиотекой из 114 400 структурно разнообразных соединений.
После уменьшения размерности этих данных появилось только около 25 повторяющихся фенотипов F-актина, каждый из которых определяется отдельными количественными характеристиками, которые могут быть изучены с помощью машин. Мы идентифицировали 2003 неизвестных соединения как индукторы связанных с актином фенотипов, в том числе два, которые непосредственно связываются с белком фокальной адгезии, талином. Более того, мы наблюдали, что соединения с различными молекулярными механизмами могут индуцировать эквивалентные фенотипы и что первоначально расходящиеся клеточные реакции могут со временем конвергировать. Эти результаты предполагают концептуальную параллель между актиновым цитоскелетом и регуляторными сетями генов, где теоретическая пластичность взаимодействий почти бесконечна, но фенотипы in vivo ограничены ограниченным подмножеством практически осуществимых конфигураций.
Клатринсодержащие адгезивные комплексы.
Лок Дж.Г. , Баскьери Ф., Джонс М.С., Хамфрис Д.
Д., Монтаньяк Г., Стромблад С., Хамфрис М.Дж.
J Cell Biol . 2019;218(7):2086-2095
DOI: 10.1083/jcb.201811160
Понимание механизмов, посредством которых комплексы клеточной адгезии (ACs) передают сигналы в двух направлениях через плазматическую мембрану, необходимо для интерпретации роли адгезии в регуляции миграции, дифференциации и роста. Был определен ряд типов AC, но на сегодняшний день все они имеют сходный состав и зависят от связи с актиновым цитоскелетом. Недавно сообщалось о новом классе AC, который обычно не связан ни с цитоскелетом, ни с интегрин-ассоциированными адгезивными компонентами, но богат компонентами клатрин-опосредованного механизма эндоцитоза. Характеристика этого нового типа структуры адгезии, которая подчеркивается митотическими клетками и клетками в долгосрочной культуре, идентифицирует до сих пор недооцененную связь между механизмом адгезии и клатриновыми структурами на плазматической мембране. Хотя это открытие влияет на то, как собираются и разбираются кондиционеры, оно поднимает множество других вопросов.
Следовательно, чтобы повысить осведомленность в этой области и стимулировать исследования, мы рассмотрим ряд наиболее важных вопросов ниже.
Подходы химической биологии к актиновому цитоскелету посредством фенотипического скрининга.
Bryce NS, Hardeman EC, Gunning PW, Lock JG .
Curr Op Chem Biol. 2019;51:40-47
DOI: 10.1016/j.cbpa.2019.02.013
Актиновый цитоскелет нарушается при раке, однако этот важнейший клеточный механизм не превратился в клиническую мишень, поддающуюся лекарственному воздействию, из-за кардиотоксичности. -последствия. Многие регуляторы актина также считаются не поддающимися лечению лекарствами, поскольку они представляют собой структурные белки, в которых отсутствуют четкие функциональные сайты, подходящие для таргетной разработки лекарств. В этом обзоре мы обсуждаем возможности и проблемы, связанные с введением лекарств в актиновый цитоскелет через его структурные регуляторы, взяв в качестве мишени тропомиозины.
В частности, мы выделяем новые тенденции сбора и анализа данных, стимулирующие фенотипический скрининг соединений на основе изображений. Наконец, мы рассматриваем, как слияние этих тенденций в настоящее время превращает функционально целостные механизмы, такие как актиновый цитоскелет и связанные структурные регуляторные белки, в расширенный репертуар мишеней, поддающихся лечению, с ранее неиспользованным клиническим потенциалом.
Ретикулярные спайки представляют собой особый класс сращений клеточного матрикса, которые опосредуют прикрепление во время митоза.
Lock JG , Jones MC, Askari JA, Gong X, Oddone A, Olofsson H, Goransson S, Lakadamyali M, Humphries MJ, Stromblad S.
Nat Cell Biol. 2018;20(11):1290-1302.
DOI: 10.1038/s41556-018-0220-2
Адгезия к внеклеточному матриксу сохраняется во время митоза в большинстве типов клеток. Однако, в то время как классические адгезионные комплексы, такие как фокальные адгезии, действительно и должны разбираться, чтобы обеспечить митотическое округление, механизмы остаточной митотической адгезии клетки-внеклеточного матрикса остаются неясными.
Здесь мы идентифицируем «ретикулярные адгезии», класс адгезионных комплексов, которые опосредованы интегрином αvβ5, формируются во время интерфазы и сохраняются в местах прикрепления клетки к внеклеточному матриксу на протяжении всего клеточного деления. В соответствии с этой ролью, истощение интегрина β5 нарушает митоз и нарушает передачу пространственной памяти между поколениями клеток. Ретикулярные спайки морфологически и динамически отличаются от классических фокальных спаек. Масс-спектрометрия определяет их уникальный состав, обогащенный белками, связывающими фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфат (PtdIns(4,5)P2), но лишенный практически всех консенсусных адгезивных компонентов. Действительно, ретикулярные адгезии стимулируются PtdIns(4,5)P2 и формируются независимо от талина и F-актина. Отличительные характеристики ретикулярных спаек обеспечивают решение проблемы поддержания прикрепления клетки к внеклеточному матриксу во время митотического округления и деления. Лок и др. идентифицируйте ретикулярные адгезивные комплексы, которые поддерживают связи между клетками и внеклеточным матриксом во время клеточного деления.
Ретикулярные спайки передают пространственную память между поколениями клеток, опосредованную интегрином αvβ5 и PtdIns(4,5)P2.
Визуальная аналитика данных микроскопии отдельных клеток с использованием совместной иммерсивной среды.
Лок Дж. Г. , Филоник Д., Лоутер Р., Патер Н., Гаус К., Кендердин С., Беднарз Т.
Материалы 16-й Международной конференции Acm Siggraph по континууму виртуальной реальности и ее применению в промышленности (Vrcai 2018 ). 2018.
DOI: 10.1145/3284398.3284412
Понимание сложных физиологических процессов требует интеграции различных идей, полученных в результате визуального и количественного анализа данных биоизображений, таких как микроскопические изображения. Этот процесс в настоящее время сдерживается несоответствием методов интерпретации данных, а также языковыми барьерами, препятствующими необходимому междисциплинарному сотрудничеству. Используя иммерсивную аналитику, мы использовали специальные иммерсивные визуализации для интеграции биоизображений и полученных количественных данных, обеспечивая более глубокое понимание и беспрепятственное взаимодействие с многомерной клеточной информацией.
Мы спроектировали и разработали платформу визуализации, которая объединяет записи покадровой конфокальной микроскопии подвижности раковых клеток с количественными данными, полученными с помощью изображений, охватывающими 52 параметра. Интегрированные представления данных обеспечивают быструю интуитивную интерпретацию, устраняя разрыв между биоизображениями и количественной информацией. Более того, иммерсивная среда визуализации способствует совместному анализу данных, поддерживая жизненно важное междисциплинарное сотрудничество, способное извлекать преобразующие идеи из быстро появляющихся больших данных биоизображений.
Активные и неактивные интегрины бета1 разделяются на отдельные нанокластеры в фокальных спайках.
Spiess M, Hernandez-Varas P, Oddone A, Olofsson H, Blom H, Waithe D, Lock JG , Lakadamyali M, Stromblad S.
J Cell Biol. 2018;217(6):1929-1940.
DOI: 10.1083/jcb.201707075
Интегрины являются основными составляющими комплексов клеточно-матриксной адгезии, таких как фокальные адгезии (FA), и играют ключевую роль в физиологии и заболеваниях.
Интегрины колеблются между активными и неактивными конформациями, однако остается неясным, влияет ли состояние активности на пространственную организацию интегринов внутри ЖК. В этом исследовании мы обращаемся к этому вопросу, а также задаемся вопросом, может ли активность интегрина регулироваться либо независимо для каждой молекулы интегрина, либо посредством локально скоординированных механизмов. Мы использовали два различных метода микроскопии сверхвысокого разрешения, стохастическую оптическую реконструкционную микроскопию (STORM) и микроскопию истощения стимулированного излучения (STED), чтобы визуализировать активные и неактивные интегрины β1. Сначала мы раскрываем пространственную иерархию организации интегрина с молекулами интегрина, организованными в нанокластеры, которые выравниваются, образуя линейные субструктуры, которые, в свою очередь, строят FA. Примечательно, что внутри FA активные и неактивные интегрины β1 сегрегируют в отдельные нанокластеры, причем нанокластеры активных интегринов более организованы.
Эта неожиданная сегрегация указывает на синхронизацию активности интегрина внутри нанокластеров, указывая на существование координированного механизма регуляции активности интегрина.
Использование системной микроскопии для понимания возникновения клеточной миграции из клеточной организации.
Stromblad S, Замок JG .
Методы Mol Biol. 2018;1749:119-134.
DOI: 10.1007/978-1-4939-7701-7_10
Миграция клеток — это динамический процесс, возникающий в результате точно настроенных сетей, скоординированных в трехмерном пространстве, охватывающих молекулярные, субклеточные и клеточные масштабы, а также в течение нескольких временных интервалов. шкалы от миллисекунд до суток. Понимание того, как миграция клеток возникает из-за этой сложности, требует сбора и анализа данных, которые количественно объединяют эти пространственные и временные масштабы. Чтобы удовлетворить эту потребность, мы объединили количественную флуоресцентную микроскопию живых и фиксированных клеток, настраиваемые инструменты анализа изображений, многомерные статистические методы и математическое моделирование.
В совокупности это составляет стратегию системной микроскопии, которую мы применили для анализа того, как клетки организуются для миграции. В этом обзоре мы выделяем ключевые принципы, концепции и компоненты нашей методологии системной микроскопии и приводим примеры того, что мы уже узнали, и куда может привести этот подход.
KIF13A-регулируемая локализация плазматической мембраны RhoB регулирует пузырчатую мембрану и миграцию пузырчатых амебоидных клеток.
Gong X, Didan Y, Lock JG , Stromblad S.
EMBO J. 2018;37(17).
DOI: 10.15252/embj.201898994
Мембранная пузырчатая (пузырьковая) амебоидная миграция может использоваться лимфоидными и раковыми клетками для вторжения в трехмерную среду. Здесь мы раскрываем механизм, с помощью которого малая GTPase RhoB контролирует вздутие мембраны и миграцию пузырчатых амебоидов. Интересно, что хотя все три изоформы Rho (RhoA, RhoB и RhoC) регулируют миграцию амеб, каждая из них контролирует подвижность по-своему.
В частности, истощение RhoB блокировало блеббинг мембран в клетках ОЛЛ (острый лимфобластный лейкоз), меланомы и рака легких, а также амебоидную миграцию ВСЕХ клеток в 3D-коллагене, в то время как избыточная экспрессия RhoB усиливала блеббинг и миграцию 3D-коллагена в зависимости от его плазмы. локализация мембраны и нижестоящие эффекторы ROCK и Myosin II. Локализация RhoB контролировалась эндосомальным переносом, он интернализировался через везикулы Rab5 и затем доставлялся либо в поздние эндосомы/лизосомы, либо в Rab11-положительные рециклирующие эндосомы, как регулируется KIF13A. Важно отметить, что истощение KIF13A ингибирует не только локализацию RhoB в плазматической мембране, но также пузыри клеточной мембраны и 3D-миграцию ВСЕХ клеток. В заключение, KIF13A-опосредованный эндосомальный перенос модулирует локализацию плазматической мембраны RhoB, чтобы контролировать вздутие мембраны и миграцию амебоидных пузырей. Кинезин KIF13A регулирует локализацию в плазматической мембране малой ГТФазы RhoB, тем самым контролируя вздутие мембраны и миграцию пузырчатых амеб, используемых лимфоидными и раковыми клетками для проникновения в трехмерное окружение.
Изоформы Rho RhoA, RhoB и RhoC все регулируют миграцию амебоидов, но контролируют подвижность разными способами. Мембранный контроль с помощью RhoB зависит от его локализации в плазматической мембране и нижестоящих эффекторов ROCK и Myosin II. Локализация RhoB контролируется интернализацией из плазматической мембраны и различными путями переноса в эндосомы. KIF13A регулирует блеббинг клеточной мембраны и 3D-миграцию, контролируя рециркуляцию RhoB на плазматической мембране. Истощение кинезина KIF13A вызывает неправильный эндосомальный перенос RhoB к плазматической мембране, что, в свою очередь, ингибирует 3D-миграцию раковых клеток.
Сфероиды-на-чипе: последние достижения и особенности проектирования микрожидкостных платформ для формирования и культивирования сфероидов.
Мошксаян К., Кашанинежад Н., Варкиани М.Е., Лок Дж. Г. , Могадас Х., Фироозабади Б., Саиди М.С., Нгуен Н.Т.
Sensor Actuat B-Chem. 2018;263:151-176.
DOI: 10.1016/j.
snb.2018.01.223
Клеточный сфероид представляет собой трехмерное (3D) скопление клеток. Синтетические сфероиды in vitro обеспечивают такие же градиенты метаболизма, пролиферации и концентрации видов, что и in vivo. Например, было продемонстрировано, что сфероиды раковых клеток имитируют микроокружение опухоли in vivo и, таким образом, подходят для скрининга лекарств in vitro. В первой части этой статьи обсуждаются новейшие микрожидкостные конструкции для формирования и культивирования сфероидов, сравниваются их стратегии и эффективность. Самые последние микрофлюидные методы для формирования сфероидов используют эмульсию, микролунки, U-образные микроструктуры или цифровую микрофлюидику. Поэтому рассматриваются инженерные аспекты, лежащие в основе формирования сфероидов в этих микрожидкостных устройствах. Во второй части этой статьи соображения по проектированию микрофлюидных чипов для формирования сфероидов и микрожидкостных чипов для культивирования сфероидов (µSFC и µSCC) оцениваются с точки зрения ключевых параметров, влияющих на формирование сфероидов, включая напряжение сдвига, диаметр сфероида, доставку культуральной среды и скорость потока.
Этот обзор призван принести пользу сообществу микрофлюидистов, способствуя улучшению дизайна и разработки микрофлюидных чипов, способных формировать и/или культивировать трехмерные клеточные сфероиды.
Пределы фенотипической пластичности актинового цитоскелета, выявленные при объективном химическом воздействии.
Брайс Н.С., Фейлес Т.В., Стен Дж.Р., Бейкер К., Захлер С., Аржаева Ю., Бишоф Л., Лайонс С., Дедова И., Арндт Г.М., Гаус К., Гулт Б.Т., Хардеман Э.К., Ганнинг П.В., Лок JG .
Электронный журнал SSRN. 2018.
DOI: 10.2139/ssrn.3299445
Многочисленные белки и пути регулируют организацию F-актина, а это означает, что в комбинаторных терминах возможно почти неограниченное количество регуляторных состояний. Следовательно, потенциал пластичности фенотипов F-actin кажется практически неограниченным. Чтобы оценить фактические пределы пластичности фенотипа F-актина, мы использовали библиотеку из 114 400 структурно различных соединений, чтобы вызвать беспристрастные химические возмущения.
Примечательно, что появилось всего 25 различных повторяющихся фенотипов F-актина. Соответственно, выбранные соединения с различными молекулярными механизмами индуцируют эквивалентные фенотипы, предполагая, что эти повторяющиеся фенотипы отражают малое количество равновесных или аттракторных состояний в актиновой организации. Это было подтверждено динамическим анализом, сравнивающим траектории фенотипов с течением времени, показывающим, как изначально дивергентные фенотипы в конечном итоге сходятся в эквивалентные конечные состояния. Мы предполагаем, что нечастые состояния аттрактора в фенотипическом ландшафте актина отражают направление высокого пертурбативного разнообразия в низкое фенотипическое разнообразие, и рассматриваем, как это может подавлять хаотические результаты во время эволюции этой сложной, функционально целостной системы.
Ретикулярные спайки: новый класс адгезивных комплексов, обеспечивающих прикрепление клеток к матриксу во время митоза.
Лок Дж.
Г. , Джонс М.С., Аскари Дж.А., Гонг Х., Оддоне А., Олофссон Х., Горанссон С., Лакадамьяли М., Хамфрис М.Дж., Стромблад С.
В ioRxiv. 2017.
DOI: 10.1101/234237
Адгезия к внеклеточному матриксу (ECM) сохраняется во время митоза в большинстве типов клеток. Тем не менее, классические адгезионные комплексы (ACs), такие как фокальные адгезии и фокальные комплексы, должны разбираться, чтобы сделать возможными перестройки цитоскелета, связанные с митотическим округлением. Учитывая этот парадокс, механизмы митотической адгезии клеток к ВКМ остаются неясными. Здесь мы идентифицируем «ретикулярные адгезии», новый класс AC, который опосредуется интегрином αvβ5, образующимся во время интерфазы и сохраняющимся в местах прикрепления клетки-ECM на протяжении всего клеточного деления. В соответствии с этой ролью, истощение интегрина β5 нарушает митоз и нарушает передачу пространственной памяти между поколениями клеток. Количественная визуализация показывает, что ретикулярные спайки морфологически и динамически отличаются от классических фокальных спаек, в то время как масс-спектрометрия определяет их уникальный состав; отсутствуют практически все согласованные адгезивные компоненты. Действительно, примечательно, что ретикулярные адгезии функционально независимы как от талина, так и от F-актина, но стимулируются фосфатидилинозитол-4,5-бифосфатом (PI-4,5-P2). В целом, отличительные характеристики ретикулярных адгезий обеспечивают уникальное решение проблемы поддержания прикрепления клеток к ВКМ во время митотического округления и деления.
Набор инструментов для анализа гетерогенности миграции мезенхимы показывает адаптивное переключение между различными режимами.
Шафкат-Аббаси Х., Ковалевски Дж.М., Кисс А., Гонг Х., Эрнандес-Варас П., Берге У., Джафари-Мамагани М., Лок JG# , Стромблад С#.
Элиф. 2016;5:e11384.
DOI: 10.7554/elife.11384
Мезенхимальная (ламеллоподиальная) миграция является гетерогенной, хотя остается неясным, отражает ли это прогрессирующую изменчивость или дискретные, «переключаемые» модальности миграции. Мы представляем набор аналитических инструментов, основанный на количественных данных визуализации отдельных клеток, для изучения этой неоднородности. Объединяя контролируемую поведенческую классификацию с многомерным анализом движения клеток, динамики мембран, состояния адгезии клеток к матриксу и организации F-актина, этот набор инструментов здесь позволяет обнаруживать и характеризовать два количественно различных режима мезенхимальной миграции, называемых «непрерывный» и «прерывистый». Количественное сравнение режимов выявляет различия в движении клеток, пространственно-временной координации выпячивания/втягивания мембраны и того, как клетки в каждом режиме реорганизуются с изменением клеточной скорости. Таким образом, эти способы представляют собой отличительные миграционные стратегии. Дополнительные анализы освещают макромолекулярные и клеточные эффекты молекулярного нацеливания (фибронектин, талин, ROCK), включая «адаптивное переключение» между непрерывным (предпочтительно при высокой адгезии / полном сокращении) и прерывистым (низкая адгезия / подавленное сокращение) режимами. В целом, этот аналитический набор инструментов теперь облегчает исследование как спонтанной, так и адаптивной гетерогенности мезенхимальной миграции.
Распутывание мембранной динамики и клеточной миграции; Дифференциальные влияния F-актина и адгезии клеточного матрикса.
Ковалевски Дж.М., Шафкат-Аббаси Х., Джафари-Мамагани М., Эндриас Ганебо Б., Гонг Х., Стромблад С., Лок Дж.Г. .
PLoS Один. 2015;10(8):e0135204.
DOI: 10.1371/journal.pone.0135204
Миграция клеток тесно связана с выпячиванием и ретракцией плазматической мембраны (в совокупности называемой «мембранной динамикой»). Это затрудняет различение регуляторных механизмов, которые по-разному влияют на миграцию и динамику мембран. Тем не менее, такие различия могут быть ценными, учитывая свидетельство того, что инвазию раковых клеток в 3D можно лучше предсказать по динамике 2D-мембраны, чем по 2D-миграции клеток, подразумевая степень функциональной независимости между этими процессами. Здесь мы применили многомасштабную визуализацию отдельных клеток и систематический статистический подход, чтобы распутать регуляторные ассоциации, лежащие в основе миграции или динамики мембран. Это выявило преимущественную корреляцию между динамикой мембран и свойствами F-actin, контрастируя с увеличением количества связей между миграцией клеток и свойствами комплекса адгезии. Эти корреляционные связи часто были нелинейными и, следовательно, контекстно-зависимыми, усиливаясь или ослабляясь со спонтанной гетерогенностью в поведении клеток. В более широком смысле мы наблюдали, что медленно движущиеся клетки имеют тенденцию к увеличению площади, в то время как быстро движущиеся клетки имеют тенденцию к уменьшению, и что размер динамических мембранных доменов не зависит от площади клетки. В целом, мы определяем макромолекулярные особенности, преимущественно связанные либо с клеточной миграцией, либо с динамикой мембран, что позволяет проводить более конкретные исследования и нацеливать эти процессы в будущем.
Немонотонные клеточные ответы на гетерогенность уровня экспрессии белка талина.
Кисс А., Гонг Х., Ковалевски Дж.М., Шафкат-Аббаси Х., Стромблад С. , Лок JG .
Интегр Биол (Камб). 2015;7(10):1171-1185.
DOI: 10.1039/c4ib00291a
Талин является ключевым компонентом адгезии клеточного матрикса, играя центральную роль в регуляции созревания комплекса адгезии и, следовательно, различных клеточных свойств, включая адгезию и миграцию. Однако исследования нокдауна дали противоречивые результаты относительно функционального влияния талина на эти процессы. Такие несоответствия могут отражать немонотонные ответы на изменение уровня экспрессии талина, которые не обнаруживаются с помощью канонических «бинарных» сравнений агрегированного контроля и нокдаунных клеточных популяций. Здесь мы применили «аналоговый» подход к картированию влияния талина в непрерывном спектре уровней экспрессии, который мы расширили за счет субмаксимального истощения талина, опосредованного РНК-интерференцией. Применяя корреляционную визуализацию, чтобы связать данные живой клетки и фиксированные данные иммунофлуоресценции на основе одной клетки, мы связали уровни талина на клетку с показателями на клетку, количественно определяющими набор клеточных свойств. Это выявило как линейные, так и нелинейные соответствия между экспрессией талина и клеточными свойствами, включая немонотонные влияния на форму клеток, ассоциацию комплекса адгезии с F-актином и локализацию адгезии. Кроме того, мы демонстрируем зависящие от уровня талина изменения в сетях корреляций между свойствами адгезии/миграции, особенно в отношении скорости миграции клеток. Важно отметить, что на эти корреляционные сети сильно повлияла гетерогенность экспрессии талина в пределах естественного диапазона, подразумевая, что эта эндогенная вариация имеет широкое, количественно определяемое влияние. В целом, мы представляем доступный аналоговый метод, который выявляет сложные зависимости от уровня экспрессии талина, тем самым создавая основу для рассмотрения нелинейных и немонотонных эффектов гетерогенности уровня экспрессии белка в клеточных системах.
Пластическая взаимосвязь между винкулин-опосредованным напряжением и площадью комплекса адгезии определяет размер и продолжительность адгезии.
Hernandez-Varas P, Berge U, Lock JG# , Stromblad S#.
Нац.коммун. 2015;6:7524.
DOI: 10.1038/ncomms8524
Спайки клеточного матрикса являются центральными медиаторами механотрансдукции, однако взаимодействие между силой и регуляцией адгезии остается неясным. Здесь мы используем визуализацию живых клеток для картирования зависимых от времени взаимных корреляций между винкулин-опосредованным напряжением и областью комплекса адгезии, выявляя пластическую, контекстно-зависимую связь. Интересно, что в то время как ожидаемая положительная взаимная корреляция преобладала в спайках среднего размера, маленькие и большие спайки демонстрируют отрицательную взаимную корреляцию. Кроме того, хотя большие изменения в площади комплекса адгезии следуют за винкулин-опосредованными изменениями натяжения, небольшое увеличение площади предшествует винкулин-опосредованной динамике натяжения. Моделирование, основанное на этом отображении винкулин-опосредованного отношения площади комплекса растяжения-адгезии, подтверждает его биологическую достоверность и указывает, что это отношение объясняет размер спайки и пределы продолжительности жизни, сохраняя спайки очаговыми и преходящими. Мы также идентифицируем субпопуляцию стационарных спаек, размер и опосредованное винкулином натяжение которых стабилизируются, и чья разборка может избирательно опосредоваться микротрубочками. В заключение, мы определяем пластическую взаимосвязь между винкулин-опосредованным напряжением и площадью комплекса адгезии, которая контролирует фундаментальные адгезионные свойства клеточного матрикса.
Дополнительные публикации можно найти здесь.
Я могу контролировать HDR и отличников. В настоящее время я ищу 2 кандидатов HDR (PhD) для проектов с существующим финансированием.
СМОТРЕТЬ: Джон Дейли забрасывает первую подачу на игре Сент-Луис Кардиналс
Автор Крис Бенгель
• 1 мин чтения
Гетти ИзображенийДжон Дейли — одна из самых неоднозначных фигур в мире гольфа, и он всегда имел склонность к драматизму. В среду у Дейли был шанс побаловаться с бриллиантом, когда он бросил первую подачу перед «Сент-Луис Кардиналс», принимающим Вашингтон Нэшнлз.
56-летнего парня явно не смутил яркий свет, когда он нанес удар по тарелке.
Джон Дейли, мисс Миссури… сегодня вечером в Буше все виды первого питча. #STLCards pic.twitter.com/LD3wMBxHKe
— Bally Sports Midwest (@BallySportsMW) 7 сентября 2022 г. К удивлению, Дейли вышел на стадион «Буш» в своем классическом сочетании шорт, солнцезащитных очков и шлепанцев.Бросок Дейли был одним из лучших первых бросков, которые мы видели у знаменитостей за последние годы.
Такие игроки, как доктор Энтони Фаучи, 50 Cent и Карли Рэй Джепсен, произвели одни из самых жестоких первых бросков, которые никогда не доходили до зоны удара.
Это был очень удачный год для Дейли, который чуть не попал в чемпионат PGA ранее в этом году, набрав 2 больше номинала в первом раунде. За свою профессиональную карьеру Дейли завоевал два крупных титула, выиграв чемпионат PGA в 1991 году и открытый чемпионат в 1995 году. .
Наши последние истории
Как смотреть Чемпионат Зозо 2022 в Нарашино ЦК
Патрик Макдональд • 1 мин.
Чемпионат Zozo 2022: Брендан Стил лидирует после первого ряда
Патрик Макдональд • 4 минуты чтения
Ставки, выборы, прогнозы на Чемпионат Зозо 2022
Спортивный персонал CBS • 4 минуты чтения
Zozo Championship 2022 шансы, поле, пики, прогнозы
Спортивный персонал CBS • 4 минуты чтения
Как смотреть LIV Golf Invitational Series в Джидде
Патрик Макдональд • 2 минуты чтения
Тони Ромо прошел квалификацию в американский любительский форбол
Кайл Портер • 1 мин.
Смотреть сейчас:
Джон Дейли выбрасывает первую подачу на игре Cardinals
Крис Бенгель 1 мин чтения
Чемпионат Zozo: Стил лидирует в первом раунде
Патрик Макдональд 4 мин читать
LIV Golf в Джидде превью
Патрик Макдональд 2 мин читать
Разборка горячего старта для Тома Кима
Кайл Портер 5 минут чтения
Бывшая звезда НФЛ Ромо прошла квалификацию в американский любительский форбол
Кайл Портер 1 мин чтения
Ким поправляется с Кэнтли на Shriners Children’s Open
Патрик Макдональд 5 минут чтения
Лопес-Чакарра одержал первую профессиональную победу на LIV Golf Bangkok
Патрик Макдональд 5 минут чтения
Бэкдор LIV Golf к очкам OWGR находится на рассмотрении
Кайл Портер 3 мин читать
Тайгер сыграет роль с командой США на Кубке Райдера 2023 года
Патрик Макдональд 2 мин читать
Хьюз обыграл Страку в драматическом плей-офф Сандерсона
Кайл Портер 4 мин читать
John Lok Management Science (книга в мягкой обложке) (2022)
Если обложка и название не совпадают, то название правильное
Расскажите об этом товаре друзьям:
Менеджмент
Цена
26.
Доставка ожидается 7-14 ноября
Наши клиенты говорят:
14-дневная политика возврата в соответствии с европейским законом о защите прав потребителей
Высший рейтинг в Trustpilot
Новый список желаний…
160 страниц
СМИ Книги Книжка в мягкой обложке (Книга в мягкой обложке и склеенной корешкой) Выпущено 15 февраля 2022 г. ISBN13 9798886061260 Издатели Notion Press Media Pvt Ltd. Страниц 160 Размеры 216 216 9 мм · 299 г Показать все
Еще от
John Lok
Книга в мягкой обложке
Изучение социально-поведенческой экономики.
Джон Лок
23.49 Купить
Книга в мягкой обложке
Изучение социально-поведенческой экономики… (2022)
Джон Лок
35,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Изучение потребительской психологии (2022)
Джон Лок
29,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Будущее Что нужно развивать (2022)
Джон Лок
27,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Изучение социально-поведенческой экономики.
Джон Лок
23.49 Купить
Книга в мягкой обложке
Изучение социально-поведенческой экономики… (2022)
Джон Лок
23.49 Купить
Книга в мягкой обложке
Что нужно улучшить нашему обществу (2022)
Джон Лок
28,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Роботы приносят какие изменения (2022)
Джон Лок
24.
Книга в мягкой обложке
Дистанционное обучение Успешный фак… (2022)
Джон Лок
26.49 Купить
Книга в мягкой обложке
Обучение организационному поведению… (2022)
Джон Лок
35,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Обучение бизнес-социальному развитию.
Джон Лок
41,49 Купить
Книга в мягкой обложке
Изучение социальной поведенческой психологии… (2022)
Джон Лок
29,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Организационное управление временем… (2022)
Джон Лок
29,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Создание желания космического туризма.
Джон Лок
20,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Analysis Robots Future Right Dev… (2022)
Джон Лок
40,49 Купить
Книга в мягкой обложке
Время исследования, как влияет на кон… (2022)
Джон Лок
27,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Обучение прогнозированию поведения потребителей.
Джон Лок
35,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Является ли искусственный интеллект Б… (2022)
Джон Лок
29,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Изучение социальных наук (2022)
Джон Лок
28,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Прогнозирование развития общественного транспорта.
Джон Лок
28,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Улучшение организационной эффективности… (2022)
Джон Лок
29,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Организационное управление электронной коммерцией… (2022)
Джон Лок
34,49 Купить
Книга в мягкой обложке
Учебные ресурсы How Assist So.
Джон Лок
29,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Причины Театр Досуг Май (2022)
Джон Лок
23.49 Купить
Книга в мягкой обложке
Учимся развивать мозг творчески… (2022)
Джон Лок
18,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Успешный фактор человеческого развития.
Джон Лок
25.49 Купить
Книга в мягкой обложке
Роботизированная разработка Как повлиять на… (2022)
Джон Лок
36,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Изучение поведенческих экономических соц… (2022)
Джон Лок
29,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Как развитие технологий влияет.
Джон Лок
33,49 Купить
Книга в мягкой обложке
Повышение уровня обучения студентов и Audi… (2022)
Джон Лок
27,99 Купить
Книга в мягкой обложке
Изучение социальной психологии (2022)
Джон Лок
40,49 Купить
Книга в мягкой обложке
Как технологии влияют на социальные.