Обонятельный вектор у женщины
Здравствуйте, Виктория!
Это выписка из конспекта по обонятельному вектору: «Обонятельница занята феромонами влечения. Сводница такая сакральная. Обонятельная девочка становится старушкой сразу после пубертата. Лицо обвисшее чуть-чуть – эмоций же нет. Про нее можно сказать «обонятельная бабка».
Эту серую мышку обонятельницу никто не хочет, даже когда орангутанги уж совсем прыгают на самку, на любую. На нее — никто. Все в 12 лет начинают играть в эти игры. На каждого орангутанга прямоходящего есть своя женщина. И они играют. И даже мышечные, а обонятельную никто не хочет. Ее в упор не видят она не заметна. И обонятельного Васю никто не видит. Это вы думаете, что вы глазами смотрите. Вот обонятельник – снова незаметно появился. Мы вначале запах слышим. Наш нос, у любого человека, улавливает запах и дает сигнал, и мы оглядываемся. Мы замечаем все других людей не ушами, не глазами, а бессознательно.
Мы видим всегда, когда кто-то приходит или уходит. Даже кожников, которые уходят, не прощаясь. А вот обонятельного нет, не ловим его запах. На мгновение ушел из зоны видимости — и все, и исчез. Поэтому всегда неясно: вроде бы его не было, а вот он уже и здесь, вроде бы только здесь был, а вот уже и нет.
Она живет на хуторе, на краю деревни, поближе к лесу, подальше от вашей вони. Избушка такая на курьих ножках. Кожно-обонятельная бабушка Яга. Сидит себе на краю деревни в пещере и морщит свои носик, соединяет мальчиков и девочек, внутри себя: берет молекулы мальчика и девочки, те которые подходят друг другу, и соединяет их своим бессознательным. Все браки на Земле созданы на небесах Господом Богом, но физически проявлены и управляются через запахи этой бабушкой.
Когда в деревне живет обонятельница. То и мясо есть, и приплод, и молоко, и падежа скота нет. И девочек хромоножек нет и мальчиков сухоручек не рождается.
Когда обонятельница приходит в коллектив, в этот момент все наши знаменитые по всей России любовные романы заканчиваются.
Только же в России это есть – работа могла привлечь человека не заработком, а именно возможностью любовного романа или сексуальных отношений. По сей день это так. В Америке, когда приходят работать, подписывают контракт, что не имеют права на любовные отношения на работе, даже на флирт, ни на что. А в России никто работать без любовного романа не будет (ну с романом тоже не будет, но иначе).
Все эти треугольники незаконных с точки зрения общества любовных отношений рушатся с появлением обонятельницы. Пять лет вот она нормально изменяла своему мужу в коллективе с коллегой. И тут случайно попалась: муж прочел письмо и т.д. А этот сексуально эксплуатировал свою секретаршу, и тут застала жена.
Чтобы ветка форума открылась, необходима регистрация.
Конечно, чтобы понять в полной мере, что такое обонятельный вектор и как ведет себя человек этим вектором обладающий, необходимо пройти тренинг. Навык распознавания векторов нарабатывается на тренинге, благодаря прослушиванию и смене мышления с обычного на системное. www.yburlan.ru/nashi-treningi/trening-pervogo-urovnya
Всегда один. Не пахнет, невидим – ненавидим!
Содержание
- Всегда один. Неприятный человек
- Всегда один. Управляющий этого мира
- Всегда один. Обоняние и эмоции – вечная вражда
- Всегда один. Внутренние противоречия
Всегда один. Неприятный человек
Нет, он и сам не стремится быть на виду. Его часто даже не замечают – настолько он серый, неприметный, исчезающий.
Ни рыба, ни мясо… Уходит всегда по-английски: вот только что был, а уже и след простыл. А может, даже и не было никого здесь? Может, привиделось? Чур меня, чур… Не человек, а привидение…
Но нет, все-таки человек. Заместитель директора. Взгляд-колючка, пронизывающий тебя насквозь. Почему-то от этого взгляда холодок страха по спине, и уже нет желания лясы точить с коллегами по работе, запивая конфеты сладким чаем. Бежишь работать, а то не дай Бог… Наябедничает директору и глазом не моргнет. Безжалостный. Как будто ненавидит тебя. Вон как морщится, когда на тебя глядит. Да нет, у него всегда такое брезгливое выражение на лице, как будто все вокруг воняет. Он и правда как будто все вынюхивает своим большим носом, везде его сует. И откуда он взялся на нашу голову?
Всегда один. Никогда не составит компанию, не порадуется празднику. Все собрались за столом, веселятся. А он в веселье не участвует, не пьет, не курит, почти не ест. Да совсем ничего не ест! Сидит сбоку, у двери, чтобы в любой момент исчезнуть.
Холодный, безэмоциональный, меланхоличный… Но шеф к нему прислушивается. Похоже, что без его советов вся эта бизнес-машина не работает. Только уж больно неприятный. Как только такие люди живут на свете?
Всегда один. Управляющий этого мира
А вот так и живут – роль у них такая. Это его величество обонятельный вектор, или, как его называют в системно-векторной психологии, «князь этого мира».
Представьте себе, что вас круглые сутки бьют по самому чувствительному месту, без перерывов на сон. Так живет человек с обонятельным вектором, чьим самым чувствительным сенсором является вомероназальный орган, «нулевой нерв», воспринимающий феромоны. Он не отключается даже во время сна и бомбардируется летучими феромонами постоянно, что при высокой чувствительности создает условия, невыносимые для жизни. Ведь весь мир «говорит» посредством феромонов. Пахнут наши мысли, наши эмоции. Через феромоны возникает влечение между мужчиной и женщиной.
Феромоны – это не запахи в привычном понимании.
Запахи воспринимаются сознательно, а феромоны либо вообще не воспринимаются, либо воспринимаются очень слабо через обоняние. Таким образом, управление в физическом, материальном мире осуществляется скрыто от нашего сознания. Мы часто не можем себе объяснить, почему одни люди нас привлекают, а другие отталкивают. А объяснение скрывается как раз в ощущении феромонов.
У обонятельника способность воспринимать феромоны в разы больше, чем у других людей, отчего у него значительно повышается возможность ощущать взаимодействия, связи, отношения между людьми. У него особый нюх, интуитивный, невербальный ум. Интуиция – это способность чуять, улавливать феромоны. В материальном мире обонятельник следует своей интуиции, то есть действует под влиянием ощущения, импульса на основе полученной через нос невербальной информации. Нулевой нерв непосредственно связан с древней частью мозга, поэтому связь между запахом и действием идет прямая, без промежуточной мысли. Если он начинает рационализировать, обдумывать свои действия, прежде чем совершить их (при наличии других векторов, так как в обонятельном векторе нет такого желания), то он совершает ошибку.
Такие способности дают обонятельнику власть над этим миром, но власть тайную, которую он не стремится афишировать. Он всегда один, всегда особнячком, готовый в случае опасности исчезнуть первым – интуиция его никогда не подводит. Главное его желание – это сохранение жизни, целостности собственного тела. Однако он понимает, что в одиночку ему не выжить. Залог его выживания – сохранение стаи. И в этом величайшая драма его жизни: ощущая глубокое презрение к людям, чьи мысли и эмоции имеют очень сильный запах, преследующий его всю жизнь, имея самое большое желание отдалиться от них, он, тем не менее, вынужден постоянно находиться среди людей. Поэтому он всегда один, даже среди людей.
В древней стае обонятельник был советником вождя, шаманом, к решению которого прислушивался вождь, потому что основывалось оно на самой достоверной информации – невербальной. Сейчас человек с развитым обонятельным вектором – это заместитель директора, финансист, политик. Одним своим присутствием он заставляет людей ранжироваться, правильно выполнять свои социальные роли.
И осуществляет это опять-таки с помощью запаха, вернее, с помощью его отсутствия.
Всегда один. Обоняние и эмоции – вечная вражда
Дело в том, что сильнее всего пахнут эмоции. Обонятельник стремится внутри себя к состоянию меланхолии – полного отсутствия эмоций, поэтому он не пахнет. Так он менее заметен, а значит, более всего способствует достижению своего желания – выжить любой ценой. Когда люди не ощущают запаха, у них бессознательно возникает страх – вроде есть человек, но как будто и не человек вовсе. Или возникает ощущение, что он появляется и исчезает, как будто из воздуха. Его ненавидят все, но бессознательно начинают выполнять свои роли в его присутствии. Особенно склонны наполняться суеверным ужасом люди со зрительным вектором, любители мистики и эзотерики, наделяющие обонятельника качествами тьмы. Ведь для них привычен высокий эмоциональный фон, а его отсутствие чревато для них большим дискомфортом.
Надо сказать, что вражда между обонянием и зрением взаимная и вечная.
Нет ничего более противного для обонятельника, чем запах сильных эмоций, исходящих от людей со зрительным вектором, имеющих наибольшую амплитуду эмоциональных раскачек. И самое большое неприятие вызывает у него страх смерти, корневой страх в зрительном векторе. Запах страха смерти настолько невыносим, что вызывает у неразвитого обонятельника архетипичное желание – избавить стаю от представителя, испускающего этот запах, от кожно-зрительной самки в состоянии жертвы (виктимный комплекс), чтобы предотвратить опасность, которую она собой представляет. Запах страха смерти вызывает полную дезориентацию в стае, заставляя людей совершать неоправданные поступки и делая ее уязвимой. А современный неразвитый обонятельник становится серийным маньком-убийцей, который душит виктимных девушек в лесопосадках, следуя своей древней программе.
Всегда один. Внутренние противоречия
Человек с обонятельным вектором сам по себе очень целостен. Когда он действует как животное, повинуясь только своей природе, он неуязвим, безошибочен.
Система может достичь некоторого равновесия, но, как правило, зрение в этом случае проигрывает борьбу, оставаясь максимум на растительном уровне развития, ведь обоняние – это доминирующий вектор. Но и неразвитым зрение не останется, то есть не будет истерик, ипохондрии и эмоциональных раскачек, так как все эти проявления делают человека демонстративным, а значит, уязвимым, а это не в интересах обоняния.
Такой человек тоже будет всегда один, но выглядеть будет несколько мягче. Он и цветочки любит, но больше неживые. И кошечку погладит, но животных в доме не держит. Его вид обманчив снаружи – взгляд добрее, но внутри все равно колючка.
Бывает, что зрение получает очень большое развитие в таком тандеме, и тогда человек может ослепнуть. Такие люди приобретают большие способности к ясновидению, то есть осознанию бессознательного. Ослепли Ванга, Ганзен – первооткрыватель матрицы «Пространство, время, информация, энергия».
Люди со сбалансированной обонятельно-зрительной связкой могут быть хорошими диагностами. Такой диагност описан в книге Людмилы Улицкой «Казус Кукоцкого». Таким диагностом могла бы быть Ванга, если бы получила медицинское образование.
Еще один пример сбалансированного состояния в этой связке – блестящий разведчик Абель, в котором соединились кожно-обонятельный шпион с подглядывающим кожно-зрительным мальчиком.
Продолжение здесь
Статья написана с использованием материалов онлайн-тренингов Юрия Бурлана «Системно-векторная психология»
Автор Марина Голомолзина
Читайте также:
ОБОНЯТЕЛЬНЫЙ ВЕКТОР
ОТКРЫТИЕ ПЕНИЦИЛЛИНА.
НОС ПО ВЕТРУ
Просмотров: 2 796
Поделитесь этим с другими:
Обонятельный вектор — Системно-векторная психология Юрия Бурлана
Тихие воды глубоки…
Даже твоя бабушка не знает, будет дождь или снег
Предупрежден — значит вооружен
Не опрокинуть тележку с яблоками!
Процент: менее 1%
Самый комфортный цвет — фиолетовый (хотя в одежде предпочтительнее серый)
Позиция в квартиле – внутренняя часть энергетического квартиля, интроверт
Тип интеллекта интуитивный, невербальный, стратегический
ПСИХОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Некоторое время назад человеческое обоняние считалось атавистическим (то есть эволюционным «возвратом»). Однако самую важную информацию мы воспринимаем через восприятие сознательных и подсознательных запахов – феромонов.
Информация, проходящая через наши органы чувств, частично осознается и не осознается – например, мое тело физически ощущает, когда ко мне прикасаются, но я не обращаю внимания (не «осознаю») на постоянное прикосновение рубашки к мое тело.
То же самое происходит и в органе обоняния. Внутри носа есть рецепторы, которые отвечают за разделение запахов на хорошие, плохие и так называемый «нулевой нерв», который различает феромоны. Все, что происходит среди людей, основано на феромонах. Они управляют двумя наиболее важными процессами: ранжированием (иерархией среди мужчин) и сексуальным влечением между мужчинами и женщинами. «Нулевой нерв» — наиболее чувствительная зона обонятельного вектора.
Феромоны — это подсознательные запахи, которые сообщают человеку больше, чем он может себе представить. Феромоны отражают эмоции, состояния и подсознательные желания. С одной стороны, если ваше настроение меняется, ваш запах меняется. С другой стороны, запах может изменить ваше настроение или эмоциональное состояние.
Мужчина обонятельного типа «чует» ваше настроение и мысли и считает их куда более вонючими, чем помойка. Для обонятеля мир — это источник различных запахов, ни один из которых не кажется ему привлекательным.
Обонятельный архетип — выжить любой ценой, а ключом к выживанию является информация. Обонятельный человек получает уникальную информацию, недоступную другим, посредством феромонального восприятия. Это дает им возможность контролировать, разделять и властвовать.
В то же время об обонятельном человеке толком никто ничего не знает. Он всегда стоит в стороне, в пределах видимости, на случай, если ему придется бежать, чтобы спасти свою жизнь. Обонятельный человек не имеет обоняния, поэтому никто не может их обнаружить. Люди других векторов с неконтролируемым страхом реагируют на отсутствие обоняния. Мы можем видеть их глазами, но не можем по-настоящему воспринимать их как живых существ.
Люди обонятельного типа могут реализовать себя только через выживание группы. Они презирают ничтожных людей из-за их вонючей глупости.
«Моя жизнь — ничто, жизнь группы — все» — так думает уретральный мужчина. Обонятельный человек, однако, не заботится о группе — за исключением одного: группа им нужна для собственного выживания (никто не может выжить в одиночку). В первобытном обществе обонятель становился советником вождя; сегодня он служит секретным агентом.
Служба внешней разведки такого рода предназначена для предотвращения опасности. Если дневной страж (визуальный тип) оглядывается и говорит, что опасности нет, а ночной страж (аудиальный тип) прислушивается к ночи и говорит, что опасности нет, то дальнейшее обнаружение любой возможной опасности ложится на обонятельного человека. . Возможно, они говорят, что группа не должна отправляться на охоту в ту или иную местность, и — не понимая, почему — другие научатся верить ему.
Служба внутренней разведки предназначена для предупреждения других об опасности внутри группы. Группа выживает при условии, что каждый выполняет свою врожденную функцию. Вот почему обонятель сует свой нос в чужие дела. Он следит за всеми, чтобы убедиться, что они работают и играют свои роли, и избавляется от тех, кто бесполезен для группы. Вот почему у людей зрительного типа есть примитивный страх перед обонятельными мужчинами, который они выражают словами: «Я почему-то чувствую, что этот человек нехороший».
Между начальником отдела уретры и консультантом по обонянию существует большой сговор. Вождь — это тот, кто терпит советника, потому что он предлагает вождю наилучшие средства выживания. Обонятель становится советником только потому, что вождь спасает его от ненависти группы.
Цель «выжить любой ценой» — непрекращающийся процесс. Мы можем представить, что он останавливается в ту же секунду, когда мир рушится.
Поэтому самая чувствительная зона обоняния человека, его нос, никогда не отдыхает. Его сон всегда поверхностен. Он всегда просыпается в самые критические моменты и понятия не имеет почему.
Именно мужчины-обонятели становятся главными героями рассказов типа «Посреди ночи я пошел в магазин, и пока меня не было дома, мой дом сгорел» или «Я опоздал на рейс, а потом нашел что самолет разбился».
Обонятельные люди обладают уникальным интуитивным невербальным интеллектом. Это не тип интеллекта, как мы обычно понимаем этот термин. Они не делают анализов, не пытаются что-либо представить или понять. Вместо этого обонятельные мужчины имеют самые точные и яркие ощущения того, что и как делать, на основе воспринимаемых феромонов. Озвучить эти чувства просто невозможно.
Обонятельный вектор не имеет ключевых слов. Ни один язык никогда не давал точных названий запахам. Обонятельные мысли лучше всего выражает их младший брат по энергетическому квартилю – оральный тип.
Что касается цели «выжить любой ценой», очень важно, чтобы выживание не ограничивалось нормами морали, культуры или этики.
Обонятельный человек занимается исключительно спасением тела. Его связывают не культура и не мораль, а жизнь как она есть (не одного человека, а всей группы, так как группа необходима для выживания). На обонятельный вектор не накладываются культурные и этические ограничения. Если обонятельный тип ограничен, все умирают. По той же причине они не различают ложь и правду. Они никогда не лгут, потому что для них этого не существует.
Развитые обонятельные люди приспособились классифицировать ложь и правду или добро и зло, но они не чувствуют этого в глубине души и не выполняют свою роль, используя эти категории. Иными словами, обонятельный человек работает в сферах, где не нужны категории правды и лжи, а важно обеспечение выживания. Они могут быть вовлечены в политику, финансы или науку. Они хотят контролировать любые угрозы своему выживанию, и это становится их профессией.
Современные службы внешней разведки уходят в прошлое. Мир глобален, и космополитические границы между странами размываются; Интернет снимает все возможные ограничения. Некоторые известные нам агенты секретных служб, например, Сидни Рейли и Рудольф Абель.
Внешняя стратегическая разведка переросла в политику. Обонятельные люди устанавливают отношения между группами, руководствуясь своей установкой «выжить любой ценой». Став влиятельными политиками, министрами финансов, министрами иностранных дел и т. д., они делают политику сдерживания. Они не берут за основу ценности морали: «У Франции нет друзей, кроме интересов».
Все финансовые системы были созданы — и даже сегодня контролируются — обонятельными людьми. Среди известных финансистов следует упомянуть Джона Сноу, Генри Полсона, Алексея Кудрина и Александра Шохина.
В настоящее время обонятельный интеллект стремится обнаруживать угрозы микромиру. Ученые-обонятели — это те, кто исследует неизвестное в областях, где существует угроза выживанию.
Они просто называют это «любопытством». В сочетании с соответствующими способностями он производит ученых мирового уровня, которые совершают прорывы (например, открытие пенициллина).
Слаборазвитые обонятельные люди считаются пронырами, или интриганами, которые часто становятся жертвами собственных интриг. Архетипичные обонятельные мужчины становятся самыми ужасными серийными убийцами и маньяками. Они выполняют свою врожденную функцию напрямую (то есть физически устраняют людей, которые не могут выполнять свои задачи для группы).
Обонятельный ребенок, склонный к меланхолии, не хочет социализироваться. Никто в их классе или районе не любит их. Им кажется, что они находятся под постоянной угрозой. Ребенок старается избежать этой угрозы и оставаться дома под любым предлогом. Если родители положительно подкрепляют такое поведение, ребенок вырастает подлецом с плохим будущим, который будет страдать от интриг.
Необходимо понимать, что правильно воспитать обонятельного ребенка, значит, надо подтолкнуть его в социум (школу, кружки или спорт, например).
Это то, что им действительно нужно. Ребенок напрягает все нервы, чтобы выжить среди других, чтобы не попасть в его чувствительную зону. Так они учатся выполнять свою роль — выживать любой ценой.
Чтобы получить более подробную информацию об особенностях редкого и удивительного обонятельного типа, присоединяйтесь к полному обучающему курсу по Системно-Векторной Психологии, который начинается с трех бесплатных лекций, которые вы можете прослушать!
Запишитесь на бесплатное онлайн-обучение
Вы получите приглашение на бесплатный онлайн-тренинг Юрия Бурлана по Системно-векторной психологии
Оригинал Авторы текста: Мария Грибова — эксперт в области международных прав и отношений, Диана Кирсс — Семейный врач. Перевод — Евгения Чистякова
Статья подготовлена на основе тренинга Юрия Бурлана по Системно-векторной психологии
Статью прочитали 5016 человек.
Опубликовано: 25 мая 2013 г.
Главная > 8 векторов
Исследования – Лаборатория Градинару
Резюме публикаций
Исследовательская группа доктора Градинару в Калифорнийском технологическом институте специализируется на разработке нейробиологических инструментов и методов, включая разработку новых вирусных векторов с оптимизированными мозговой тропизм после системного родоразрешения. В дополнение к разработке технологий для нейронауки доктор Градинару также использует такие инструменты и методы для анализа схем, лежащих в основе нарушений движения, настроения и сна (Gradinaru et al., Science, 2009).; Сяо и др., Нейрон, 2016 г.; Чо и др., Нейрон, 2017 г.; Oikonomou et al., Нейрон, 2019 г.). Группа Gradinaru в Калифорнийском технологическом институте недавно разработала и распространила различные новые инструменты для менее инвазивной доставки генов и оптогенетики в мозг (Deverman et al. Nature Biotechnology 2016; Chan et al. Nature Neuroscience, 2017; Challis and Kumar et al. Nature Protocols, 2019; Bedbrook et al.
Nature Methods 2020; Кумар и др. Nature Methods 2020). Вместе с сотрудниками и своей собственной группой в Калифорнийском технологическом институте д-р Градинару в настоящее время применяет эти инструменты доставки генов к нарушениям развития нервной системы и нейродегенеративным заболеваниям (Challis et al. Nature Neuroscience, 2019).; Раух и др. Nature 2020).
Расширение набора инструментов для исследования мозга
Несмотря на богатство и качество фундаментальных исследований в области неврологии, мы по-прежнему мало что можем сделать для лечения или профилактики большинства заболеваний головного мозга. Между тем, усилия отрасли уклонялись от этой области, особенно после того, как ряд основных лекарств-кандидатов для лечения болезни Альцгеймера не оправдал ожиданий ( 1 ).
Мои предыдущие исследования, связанные с разработкой и использованием оптогенетики ( 2 , 3 ), чтобы понять, как глубокая стимуляция мозга работает при болезни Паркинсона (БП) ( 4 , 5 ), привели к двум ключевым выводам: нам нужно смотреть и вмешиваться на ранних стадиях прогрессирования заболевания головного мозга, и мы должны иметь доступ к соответствующим клеточным популяциям с помощью неинвазивных, но точных инструментов для исследования, предотвращения, сдерживания или даже обращения вспять болезни. Накапливающиеся данные выдвинули на первый план третье понимание: нам, возможно, придется заглянуть за пределы мозга, чтобы полностью понять нарушения мозга (9).0113 6 , 7 ).
Моя цель состояла в том, чтобы разработать эффективный набор инструментов для нейромодуляции, чтобы мы могли начать преодолевать разрыв между тем, что мы знаем, и тем, что мы можем сделать для лечения мозга. Чтобы достичь минимально инвазивной оптогенетически опосредованной модуляции, мы должны иметь возможность проникать через гематоэнцефалический барьер (ГЭБ), чтобы векторы можно было доставлять системно, а не посредством внутричерепных инъекций, и устранять плохой доступ видимого света через ткань, чтобы большие ткани объемы могут быть набраны без имплантации оптических волокон.
Для раннего вмешательства нам нужно отказаться от нейронного и мозгоцентрического взгляда на неврологическое заболевание.
Проникновение через гематоэнцефалический барьер
Мозг взрослого человека защищен от соединений, циркулирующих в крови, с помощью ГЭБ. Доставка генов в мозг требует хирургического вмешательства, которое не только является инвазивным, но и приводит к ограниченному покрытию ткани и неравномерной экспрессии генов. и повреждения. Таким образом, системная доставка предпочтительнее фокальной доставки, поскольку она не требует хирургического вмешательства и обеспечивает более широкий охват тканей. Мы впервые разработали мощную стратегию, которая позволяет генерировать и выбирать векторы аденоассоциированных вирусов (AAV) с оптимизированными свойствами посредством Cre-рекомбинации. -зависимая эволюция, нацеленная на AAV (CREATE) ( 8 ). Моя лаборатория использовала CREATE для синтеза AAV, которые пересекают ГЭБ и трансдуцируют большинство клеток мозга взрослых мышей (см.
первый рисунок). Эти системно доставляемые AAV обеспечивают неинвазивную трансдукцию определенных типов клеток и областей у грызунов при использовании с генными регуляторными элементами ( 9 ).
Разработка опсинов для минимально инвазивного рекрутирования больших объемов тканей
Во время нашего поиска системной доставки AAV с грузами опсинов мы узнали, что более низкое число копий трансгена на клетку, производимое системной доставкой, приводит к неэффективной общей проводимости опсина. Нам нужны были лучшие, высокопроизводительные опсины, чтобы сделать этот метод жизнеспособным. Чтобы получить такие опсины, мы встроили разнообразие в канальный родопсин (ChR), используя структурированную СХЕМУ (9).0113 10 ) рекомбинация белков от разных родительских опсинов, а затем измеряли мембранную локализацию и фототоки. Однако доминирующий метод тестирования свойств опсинов — зажатие фрагментов целых клеток — имеет низкую пропускную способность, поэтому мы использовали машинное обучение с ограниченными обучающими данными, чтобы эффективно исследовать обширное пространство последовательностей и ограничить количество тестируемых опсинов.
С помощью моделей гауссовского процесса, обученных на ограниченном экспериментальном наборе из 102 функционально охарактеризованных ChR, мы выбрали последовательности ChR, которые, согласно предсказаниям моделей, будут экспрессироваться, локализоваться и функционировать. В результате была получена панель ХР с высоким фототоком и исключительной светочувствительностью (ХР) ( 11 ).
Эти высокопотоковые опсины не только преодолевают ограничение количества копий при системной доставке, но также позволяют размещать источник света на расстоянии от трансдуцированных клеток (например, на истонченном черепе мыши, а не имплантировать непосредственно в мозг). мозг).
Результатом этих достижений является более эффективное покрытие как светом, так и трансгенами. Это может быть особенно полезно для продвижения оптогенетических исследований на нечеловекообразных приматах (NHPs), ключевой модели, имеющей отношение к здоровью человека. Оптогенетика оказала относительно ограниченное влияние на исследования NHP по сравнению с ее влиянием на более мелкие модельные организмы, в основном из-за проблем с охватом, связанных с ограничениями доставки генов и фотонов.
Использование системной доставки высокоэффективных опсинов для преобразования и рекрутирования больших областей мозга в NHP может обеспечить лучшую нейромодуляцию в этих важных моделях животных.
Преодоление нейронного и мозгоцентрического взгляда на неврологические заболевания
Исследования нейродегенерации были сосредоточены в основном на поврежденных нейронах и цепях в мозге. Тем не менее, данные указывают на роль воспаления, опосредованного ненейрональными клетками головного мозга и связями между телом и мозгом (через периферическую нервную систему и/или нарушенный ГЭБ) ( 6 , 7 ).
Разработка средств доставки генов, специально предназначенных для ненейрональных клеток головного мозга, связанных с нейродегенерацией, таких как эндотелиальные клетки головного мозга, которые составляют сосудистую сеть и ГЭБ, может изменить парадигму, поскольку нарушенный ГЭБ может инициировать и/или ускорять нейродегенерацию. Способность проводить как позитивную, так и негативную селекцию является ключом к получению векторов с желаемой тропностью к органам, типам клеток и клеточным областям.
Для этого мы преобразовали нашу платформу CREATE в мультиплексную M-CREATE ( 12 ), стратегию скрининга in vivo, которая включает в себя секвенирование нового поколения, создание синтетических библиотек и специальный конвейер анализа. Используя M-CREATE, мы идентифицировали варианты капсида, которые демонстрировали смещение в сторону сосудистых клеток или которые нацелены на нейроны с большей специфичностью, а также капсиды, которые широко трансдуцировали центральную нервную систему или пересекали ГЭБ у различных линий мышей.
Поскольку слабый ГЭБ может пропускать патологические факторы в мозг ( 13 , 14 ), функциональное воздействие на проницаемость ГЭБ с помощью искусственных ААВ может повлиять на доступ тела к мозгу через кровообращение.
Модулирование проницаемости дает возможность изучать и/или восстанавливать барьер, который может быть ослаблен при заболевании, или доставлять терапевтические средства в мозг посредством кровотока.
Модулирование периферической нервной системы для устранения центральной дисфункции
Синуклеинопатии представляют собой нейродегенеративные заболевания, характеризующиеся агрегацией нерастворимых амилоидных фибрилл α-синуклеина (αSyn). БП представляет собой синуклеинопатию, характеризующуюся гибелью отдельных популяций нейронов среднего и ствола головного мозга и двигательной дисфункцией. Примерно 90% случаев болезни Паркинсона возникают спорадически, что затрудняет изучение ее этиологии. Новые данные свидетельствуют о том, что немоторные признаки, такие как потеря обоняния и желудочно-кишечные расстройства, могут предшествовать клиническому диагнозу ( 15 , 16 ).
Посмертные биопсии лиц с бессимптомным диагнозом БП выявили наличие патологических скоплений αSyn в тканях желудочно-кишечного тракта, что привело Браака и его коллег к предположению, что агрегация αSyn может возникать в периферических тканях, таких как кишечник, и распространяться в мозг по вегетативным волокнам.
( 17 , 18 ). Таким образом, понимание роли периферической нервной системы в распространении патологии может помочь нам понять нейродегенерацию и предотвратить ее.
Признавая отсутствие инструментов и методов, доступных для изучения периферической нервной системы, мы разработали очистку тканей всего тела и настраиваемую и быструю систему экспрессии векторов, которую мы использовали для оценки сетевого взаимодействия в энтеральной нервной системе (ЭНС) ( 19 , 20 ). Мы вводили небольшое количество предварительно сформированных фибрилл αSyn в слизистую оболочку кишечника мышей (особенно в стенку двенадцатиперстной кишки с высокой иннервацией) и наблюдали последующее воспаление желудочно-кишечного тракта и физиологические изменения в ЭНС (измеряемые с помощью оптогенетики, визуализации кальция и изменений в фекальной продукции) (9).0113 21 ). Патология ЭНС также была связана с тяжелым дефицитом лизосомального фермента глюкоцереброзидазы, кодируемого геном GBA1 , который, как известно, участвует в развитии болезни Гоше и БП.
Поэтому мы доставили GBA1 с помощью капсида AAV-PHP.S, который эффективно трансдуцирует периферическую нервную систему для неинвазивного восстановления глюкоцереброзидазы на периферии. Это привело к уменьшению патологии αSyn и намекает на возможную терапевтическую мишень для ранней БП.
Наконец, мы продемонстрировали, что инокуляция фибрилл αSyn старым мышам, но не более молодым мышам, приводила к прогрессированию гистопатологии αSyn в среднем мозге и снижению дофамина в стриатуме и последующим двигательным дефектам. В совокупности эта работа (обобщенная на втором рисунке) смещает фокус этиологии нейродегенеративных заболеваний на периферическую нервную систему и расширяет наше понимание роли, которую играет ЭНС при продромальной синуклеинопатии. Фибриллы
αSyn могут нарушать работу энтеральной нервной системы, а старение повышает восприимчивость к прогрессированию патологии αSyn из кишечника в мозг, что приводит к двигательной дисфункции. Эти вредные эффекты были смягчены переносом периферического гена GBA1 посредством системного введения специально разработанных AAV.
Резюме результатов
Мы стремимся преодолеть разрыв между тем, что в настоящее время возможно в области нейромодуляции, и тем, что необходимо для значительного улучшения жизни людей с невропатологиями. Мы использовали принципы белковой инженерии для неинвазивной, эффективной и специфической доставки эффекторных геномов в нервные ткани и ассоциированные типы клеток ( 22 ). Мы добились успехов в создании системных вирусов, проникающих через ГЭБ, которые открывают потенциал для неинвазивной модуляции мишеней глубоко в мозгу. Кроме того, мы использовали нашу доставку генов и оптогенетические инструменты для модуляции периферической нервной системы в мышиной модели БП, демонстрируя потенциальную полезность нейромодуляции за пределами головного мозга для лечения заболеваний головного мозга. Остается ряд соответствующих барьеров, в том числе необходимость расширения скромного предела упаковки AAV, проникновения в BBB у различных видов, а также тщательного рассмотрения и смягчения побочных эффектов AAV с помощью лучших векторов, методов доставки и стратегий иммунного избегания.